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标题: 贴壁培养NSC后，加化合物进行分化后，细胞聚团怎么办？ [打印本页]

作者: 碧落 时间: 2014-1-2 10:55 标题: 贴壁培养NSC后，加化合物进行分化后，细胞聚团怎么办？

贴壁培养NSC,第二天加化合物，同时撤去生长因子，进行分化。后进行免疫组化，发现细胞总是会移动聚团，形成网络状的结构。接种时，细胞是均匀的。8 C; ^6 D" I# U' l9 D# o2 M
请问大家有出现这种现象么？怎样予以解决呢？因为细胞聚团，导致细胞重叠而非单层，会影响后期的图像分析~~~

作者: afei198520 时间: 2014-1-2 12:57

我也碰到过类似的问题，请问你用的包被试剂是什么？包被程序？有可能是孔板包被的问题。

作者: 碧落 时间: 2014-1-2 20:30

回复 afei198520 的帖子$ | b2 {! J! L: q* B

谢谢回复~多聚鸟氨酸+fibronectin。正常培养的时候不聚团，分化的时候才聚团呢？/ @4 p2 _5 h1 Y' M4 V6 Z8 i9 N# H
请问你有什么好的包被方法么，欢迎多多交流

作者: afei198520 时间: 2014-1-3 09:31

回复碧落的帖子- E5 h% U+ l3 y2 |8 l0 i

现在我只用laminin包被，基本上不会出现什么问题。另外我觉得你可以试试NSC接种后让细胞长两天适应一下再进行分化。

作者: jojo1988509 时间: 2014-1-3 13:40

NSC不是本身就会出现长多了就向上长然后就像团状的情况么？

作者: 碧落 时间: 2014-1-7 13:24

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嗯，适应两天再给药会稍微好点，也是时好时坏的。请问lamin包被的具体条件是什么？多少浓度，包被多长时间？什么溶液？谢谢……我想试试

作者: angelyannan 时间: 2014-1-10 20:31

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本人买的是sigma的，用无菌的PBS配制，然后你按照说明书的浓度和包被时间，包被条件操作就好了

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