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标题: 求推荐!!!episomal质粒提取试剂盒 [打印本页]

作者: sirius_zou    时间: 2014-3-12 10:22     标题: 求推荐!!!episomal质粒提取试剂盒

LZ正在用episomal方法重编程ips,看了关于episomal质粒的要求,只有两点:①质粒必须去类毒素,②质粒浓度大于1ug/ul
6 ^( N9 |4 D9 r& u. F坛子里应该有不少人在用这个方法吧,求推荐适用的质粒提取试剂盒,最好有货号,非常感谢!$ V6 I" P7 k. T) T/ ?
4 P# u0 P- J& K. }1 w+ i, N
不知道QIAGEN公司的 EndoFree Plasmid Maxi Kit (货号:12362)可以否,望告知,不胜感激!) e" p2 I  t6 x0 ~
[attach]59820[/attach]
作者: huangcong1988    时间: 2014-3-15 13:48

不知道楼主用于诱导的质粒是能否分享,我可以给你推荐一个质粒提取试剂盒,很好用,去内毒素提取质粒的
作者: Hi'Kitty    时间: 2014-3-17 09:57

你好 我们实验室用 tiangen 无内毒素质粒大提试剂盒(DP117) 很ok 而且不贵 可以试下
作者: sirius_zou    时间: 2014-3-19 13:21

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9 C( A4 u8 ?5 I. l( r6 E( n: y7 }+ [* p( e
1. 您是用的这款kit提episomal质粒做ips吗?天根的靠谱不?6 D6 A/ R$ q7 b) ~: \! {) {
2. kit protocol上写的可以增加步骤 “每1 ml洗脱液加入1.42 ml异丙醇以及0.42 ml 5M NaCl” 来提高质粒浓度,不知道质粒浓度能达到1ug/ul吗?
作者: Hi'Kitty    时间: 2014-3-20 11:11

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- d. B& I. o2 U5 R4 H- o6 u
0 `" @+ ?1 T0 t; r6 m! p* ?2 e是呀 木有问题呀 洗脱液我们是直接用 不加那些步骤
作者: Hi'Kitty    时间: 2014-3-20 11:15

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. r% Y3 C' Y, ^0 l7 t6 h" d/ k
9 X8 s% o7 _! [0 p但是不知道你的菌液是用什么摇的,摇了多久。
6 V  C9 n. s9 X6 `* y( O我们用TB培养基 48h 200ml
* ^7 ^3 n8 L5 w3 g2 J3 I" K用LB的话营养不够的
作者: sirius_zou    时间: 2014-3-24 13:30

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; [+ W1 x+ {) C
$ Q7 J0 \/ k+ ^) t" W我用LB培养基摇菌3 Q5 L. ~4 E( a5 L- s
你用天根的这个可以达到1ug/ul 啊?
作者: Hi'Kitty    时间: 2014-8-21 12:13

回复 sirius_zou 的帖子% Q1 k: E/ K0 L, l2 @; l6 t5 k

3 A' _" {5 o% ~- u4 r/ E) S6 Z6 T! f5 b) Esorry 回复晚了 可以的 提的好的时候可以2以上 但是TB培养基是重点
作者: heirrii    时间: 2014-8-25 10:39

我们用的QIAGEN公司的 EndoFree Kit ,效果挺好的,质粒电转诱导。
2 h$ {& L3 s; c% Z0 O4 l% l4 m+ L有一次用的qiagen的普通大体kit,提出的质粒浓度也挺好,也能诱导ips
作者: sirius_zou    时间: 2014-8-25 10:42

回复 Hi'Kitty 的帖子- H# r  g4 E. w2 G" d6 C
1 c$ R  S. H2 a# B4 I+ m1 y
谢谢回复!!!$ |, ]- L3 c3 t5 M9 f9 K/ ^
我已用你推荐的天根试剂盒,重编程ips成功,谢谢!!!
作者: Hi'Kitty    时间: 2014-9-10 14:06

回复 sirius_zou 的帖子7 e8 S% t( W  ]) I

5 M1 m3 m8 ^( u1 B) x1 k不客气 祝后续试验顺利




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