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标题:
间标磁珠汇总——轻松分选任意类型细胞
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作者:
miltenyi
时间:
2014-6-19 16:18
标题:
间标磁珠汇总——轻松分选任意类型细胞
本帖最后由 miltenyi 于 2014-6-19 16:18 编辑
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我们知道,做细胞分选,首先要知道目的细胞与其它细胞相比,有什么特别的标志,如常用的细胞表面CD marker,最简单的方法是选择直接耦联相应抗体的磁珠,即所谓的直标微珠,如用CD4 microbeads来直接分选CD4 + T细胞。但是,美天旎的直标磁珠多是针对小鼠、大鼠、人和灵长类的,针对其它物种的直标磁珠我们还在不断研发中,又或者您关注的细胞类型较新,我们没有相应磁珠时,我们还有没有办法用磁珠分选呢?答案是肯定的,美天旎有多种间标微珠可供选择,利用间标微珠,几乎可以分选任何物种的任意类型的细胞,只要目的细胞有特定的标志和有相应的一抗,我们就可以对其进行磁性分选。那么,美天旎的间标微珠有哪些呢?
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1、Anti-FluorochromeMicroBeads,抗荧光素微珠
:此类微珠上耦联了荧光素,如FITC、PE、APC、Cy5、Cy7等。
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如图1:从人PBMC中分选CMV特异性T细胞,用PE标记的CMVpp65/A2四聚体标记CMV特异性T细胞,再用抗PE微珠将其从PBMC中阳性分选出来,本次分选过两个MS柱。
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2、Anti-BiotinMicroBeads和Streptavidin MicroBeads,抗生物素磁珠和链酶亲和素磁珠
:二者均可以捕获生物素耦联的一抗所结合的细胞、生物大分子等,其区别在于:前者只识别耦联了抗体和细胞的生物素,不会结合溶液中游离的生物素,而后者会识别游离生物素,因此,如果待分选细胞悬液中存在游离生物素,则最好选择Anti-Biotin MicroBeads。
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如图2:先用CD3-Biotin标记人PBMC中的CD3+细胞,再用Anti-Biotin MicroBeads进行阳性分选,过一次MS柱。
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3、Anti-Ig MicroBeads
:适用于分选由无荧光素标记的一抗所标记的细胞,如Anti-Mouse IgM MicroBeads,可用于分选小鼠IgM型一抗识别的细胞。
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如图3:用CD16(mouse IgM型)一抗来标记人外周血淋巴细胞,然后用Anti-Mouse IgM MicroBeads进行阳性分选,过一次MS柱。
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因此,不夸张的说,结合直标磁珠和间标磁珠,我们几乎可以分选任何物种中任意类型的细胞。
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