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标题: [求助]关于NK细胞体外扩增的一些问题 [打印本页]

作者: nailute1985 时间: 2015-3-25 10:32 标题: [求助]关于NK细胞体外扩增的一些问题

由于小弟近期准备做NK细胞的体外扩增培养，之前没有接触过有关方面的问题，希望有实验经验的大神给予回答谢谢。
1、如果做探索实验的话外周血的用血量最小可以是多少？对分离PBMC的实验部分 ficoll分离法是不是最优秀的？/ ]) A u- ^$ W( y
2、在加入NK细胞刺激因子的时候需不需要加入K562肿瘤细胞株，因为有文献说K562可以提高NK扩增的效率。; V h9 n! W0 G. Y; i
3、刺激因子除了IL-2,IL-15,需要加CD3单抗么？
4、培养基选择，针对NK细胞的培养基哪个是最好的？XVIVO15?1640或者是其他？. f5 Z: l3 F! }. Z: E
5、杀伤性实验LDH方法可否？

作者: 奇幻雪蓝 时间: 2015-3-25 14:46

1.你是做学术研究还是临床治疗，如果是学术研究，上面的都可以试；5 N! t9 N' @5 k3 N& ~5 F7 V8 t
2.如果是临床治疗，就不要加入肿瘤细胞株了，其他的请和医生沟通！

作者: Ernest 时间: 2015-3-27 10:42

20ml外周血，15ml分离单个核，5ml制备血清

作者: nailute1985 时间: 2015-3-27 10:45

回复 Ernest 的帖子, @" b- x5 ~% w0 Q" I
2 _, J) A) j3 \) I* P+ q
什么意思？

作者: syj7888 时间: 2015-3-27 11:21

K562肿瘤细胞株，现在有公司用来培养NK细胞进行治疗的，工程细胞培养法

作者: nailute1985 时间: 2015-3-27 13:47

回复 syj7888 的帖子
k1 X- f( B; G) T5 i$ k0 l
用于细胞治疗的NK细胞体外扩增实验，用K562细胞刺激会不会在回输的时候对病人有风险？或者是在扩增出来后需要用射线杀死K562?

作者: suning5 时间: 2015-3-31 10:01

IL-2，IL-4，IL-7及IL-12等细胞因子，显著提高增殖能力

作者: nan_yu1695 时间: 2016-7-21 09:56

也摸索了很久，只加各类白介素没有成功过

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