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标题: 新手求教，诱导分化21天，细胞都长满了，如何解决这个问题？ [打印本页]

作者: 梦月寒 时间: 2015-8-21 14:48 标题: 新手求教，诱导分化21天，细胞都长满了，如何解决这个问题？

如题

作者: wf78365421 时间: 2015-8-21 17:00

传代

作者: 梦月寒 时间: 2015-8-23 22:22

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加药的怎么传代

作者: saier.HK 时间: 2015-8-24 08:39

血清浓度降低些，5%FBS jiuOK

作者: yinchong42 时间: 2015-8-25 00:30

什么的分化？成骨吗？一般来说诱导分化都是需要考虑细胞增殖的，很多时候需要控制实验开始时细胞的数量) w4 v9 A" {0 b, i4 [/ o6 u

作者: 漂流瓶 时间: 2015-8-25 18:00

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同意，这类试验在开始的时候就要考虑细胞接种密度吧。虽然这个说起来容易，其实操作起来不是很容易。我培养的是神经干细胞，如果接种密度太小，很容易分化或是凋亡，可是如果过大，增殖过快，最后成像效果又很不好，所以只能慢慢摸索了。

作者: yinchong42 时间: 2015-8-25 22:56

回复漂流瓶的帖子- P( G# V( U# M7 e. j1 r1 N! G
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我是做成骨诱导，但是我们的诱导培养基是具有抑制增殖功能的

作者: 漂流瓶 时间: 2015-8-27 20:52

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哦，所以你培养的成骨细胞应该是增殖很缓慢或者基本不增殖才对，是吗？这个我就不知道了。目前我在做的蛋白中，有一种小分子应该也是具有抑制作用的，抑制分化增殖和迁移（目前的假设），可是实际实验过程中，对于分化和增殖的影响却很多样性，并不是我们一开始推论的纯粹的抑制作用。这个机理比较复杂，里面包含很多影响因素，并且体外和体内环境也不完全一致，所以我目前也在摸索中。

作者: 梦月寒 时间: 2015-9-1 20:07

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我也做成骨诱导，请问你的抑制增殖用的什么，还有做CCK8测增殖不是矛盾了吗

作者: yinchong42 时间: 2015-9-2 15:26

回复漂流瓶的帖子9 g# b# a7 x; O! w; B% B- M
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就是这个意思吧，以前我做肌肉分化的时候，可以说就是在血清饥饿的条件下培养，细胞在增殖受阻的情况下就会分化了，成骨诱导也可以说是差不多吧

作者: yinchong42 时间: 2015-9-2 15:27

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不好意思有点误会了，我们就是正常的成骨诱导而已，只是诱导成骨的细胞增殖没有那么快而已

作者: bleachmen2 时间: 2015-12-3 16:56

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胰岛β细胞分化的做过吗？不知道现在有没有成品试剂盒卖？

作者: yinchong42 时间: 2015-12-3 21:00

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没做过，不好意思啊

作者: luyue6453 时间: 2016-3-5 16:36

买成品的诱导试剂盒，在细胞不太密的情况的就开始诱导，及时后期长的很密只要不脱落你一样可以成功的。

作者: studentyin 时间: 2021-6-1 23:51

主要还是接种密度要摸索一下

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