脐带提取间充质干细胞主要影响因素

tefuir

求助：最近从脐带提取间充质干细胞总是失败，原代细胞养不起来，有时候提不出来细胞，想问下各位大神，做原代提取的时候应该注意哪些问题呢？

水蒸气

组织块贴壁法，一般，六七天细胞爬出来

阳光正暖

脐带间充质很好培养的，我觉着问题可能是在培养基上，建议更换培养基

扉页樱花

一般酶消化的话是会导致细胞分化的；组织块培养的话，培养基要少一点，让组织块可以固定贴到壁上，细胞才容易爬出来，细胞爬不出来的话，可以加大血清的浓度；而且华通氏胶要碎一点，组织块太大也不利于细胞爬出。

wanchaoyan

酶消法做的时候，体系太黏，细胞易抱团，得到的细胞太少。可以试试调整一下酶的浓度和消化时间。组织块法只要剥离血管，洗干净，将剥出的华通氏胶剪碎，贴壁很容易就爬出来了。

xyzwt1984

组织贴壁法制备MSC，如果培养基、操作、原料都没有问题的话，快的一周不到就有原代细胞爬出

15558156935

一般组织贴壁的话细胞10天左右就爬出来了，酶消化对细胞伤害大，消化时间不好控制很容易过头

tefuir

回复 gengtongyu521 的帖子
9 t8 Y& E6 D8 y5 p" u9 T* C
; K4 t( r% j8 U- @+ |我们主要是用酶消化法，很少用爬块法，而且我们用爬块法爬出的细胞状态也不太好。你们用爬块法一般几天能爬出块呀

tefuir

回复 xiaolu19781999 的帖子
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9 W  H! ~3 v: ?换了新的培养基，用的是血替培养，但是最近总发现培养基有白色絮状物吸出。

tefuir

回复 卓俊文 的帖子
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胶原酶浓度是1%的I型胶原吗，消化时间三个小时，另外我想问下，你们用的离心力都是多少？离心力过高会不会导致细胞不易贴壁？