免疫细胞体外培养生长特性

ltickp

分离外周血PBMC后，体外活化培养扩增培养中免疫细胞特性，如何判断细胞生长速度达到最快

baby00000003

这只是我瞎猜的，hoechst或者DAPI染一下核，然后流式看看荧光强度，可以反应DNA的复制活跃程度吧，然后就推算出细胞分裂速度的变化趋势

UlissesJR

测一个生长曲线

woshibotao_01

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8 N& j* r; B4 c: w+ O8 C+ w
! b2 H& q  A- f* N9 {! s- y一般使用血细胞计数仪，先吹散细胞团再计数，根据生长曲线判断  K2 d% L2 d6 h
7 B% t, }# z- y& s% T# q9 Z
另外也可以做流式，测细胞周期，总之都要吹散

honey棉花

用CFDA-SE染色细胞，流式检测荧光强度。或者用CCK8染色，用酶标仪检测，可以观察整个培养周期

niliu730323143

种96孔板，每孔细胞数相同，可以添加复孔。不同时间进行CCK8染色，用酶标仪检测，做个标准生长曲线，应该是最简便的方法了吧。

stella2015

通过最简单的方法吧，看你的图片，可以算是镜检的结果吗？T细胞的生长状态并不是很好，第一、二张图片显示细胞碎片很多，你要是细胞染色的活率应该不是很高吧，细胞边缘不饱满，折光率不高，说明细胞大多处在凋亡期，如果不及时处理，可能很难长起来。第三张图片细胞大片聚集成团成云雾状，不透光无折射率，应该是大片死亡的细胞聚集而成，细胞状态非常不好的说，能不能长起来很难说~~

ltickp

回复 stella2015 的帖子/ u% T8 A0 d, S

) a: [' L  \' f- w转袋后长得非常快，900ml培养液颜色2天就很黄了

nailute1985

回复 stella2015 的帖子8 K. B& C3 M4 M3 Y( k8 A! c+ p
& \9 m+ H: @6 J3 x; k4 r, G
哥，明显这三张图细胞状态非常之好，活化的T细胞增殖初期就是大片的细胞团，死细胞团不是这样的

stella2015

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  d- f1 j# |. _! S- ~+ b" L2 }9 n: Q' x4 I
抱歉我是以一般转染完慢病毒的T细胞状态好坏作为判断经验，如果是转染完的细胞状态是这样，转染结果多半不会太好~