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[请教] 细胞计数问题讨论 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2017-2-6 16:58 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
请问用血平板细胞计数平板加多少体积计数为之标准啊?我发现加多加少计算结果都不一样,操作流程网上很多,但标准的加入体积没有。有老师说是加到充盈没关系,它浮到最大体积就不会上浮了,不知道对不对
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沙发
发表于 2017-2-6 17:53 |只看该作者
离心重悬后,吹打均匀,迅速取50ul,加入450ul吹打均匀,迅速去10ul计数。这是标准的流程。(四孔总数/4)*10*10^4.
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金话筒 优秀会员

藤椅
发表于 2017-2-7 09:54 |只看该作者
回复 121qwq 的帖子
1 \" u* `6 O, c3 |: n$ N( h1 G2 v* {+ W7 j
现在有条件的实验室都使用血球计数仪,可对各类型细胞做计数,血球计数板计数体积是固定的,与加液量无关,加的多也流失。计数重复性好坏与细胞悬液混匀程度相关。
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板凳
发表于 2017-2-7 10:16 |只看该作者
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离心重悬后,吹打均匀,根据细胞浓度进行适当稀释,一般都是取10ul加到计数板上,四个区域计数取平均值*稀释倍数*10^4。
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报纸
发表于 2017-2-7 13:29 |只看该作者
吹打均匀,10μm用来技术即可
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地板
发表于 2017-2-7 14:17 |只看该作者
取10-20ul液体从计数板一侧加入,使液体刚好均匀充满整个计数区域。液体滴加太多会从四周溢出来,可能使计数区域细胞分布不均,影响计数准确性。而且滴加液体时候不要移动盖玻片。
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发表于 2017-2-8 13:42 |只看该作者
我们做的时候都是取10u来计数
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发表于 2017-2-9 10:47 |只看该作者
老师说的对,就是这样
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