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本帖最后由 泡沫清风 于 2009-8-22 11:01 编辑 9 ]. c4 m: s+ c$ e$ W2 [# B" V
4 X7 e2 U V* A, H% q8 I P1 H1 s
接种质粒48小时,观察细胞并收集病毒:
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x$ G3 R l! B+ i2 l8 v# N$ w
6 u8 x( M8 ?# U/ C! ~" ]' Z {0 d4 z1 K' w. E7 E
应该说我的细胞状态还是不错的。一般我48小时收一次病毒,如果细胞状态好,72小时再收一次,当然病毒滴度肯定没有48小时的高。
# c/ D1 V7 U1 G9 L3 N" I9 W- v- w$ l6 O
收集时,一般可以先2000转离心,再用0.45um的滤器过滤。不过我直接用0.45um过滤,省事。呵呵% ^/ |0 j- s0 j: _
过滤完病毒上清可以先浓缩。50000g,4℃离心2h。但我一般不浓缩。
0 ?0 H: R% S+ S如果在2、3天之内要用这批病毒可以放在4℃,如要要在以后用,就分装保存于-80℃。一般冻存一次滴度降1/3到1/2。 |
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