干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

 

 

搜索
朗日生物

免疫细胞治疗专区

欢迎关注干细胞微信公众号

  
查看: 158755|回复: 13
go

胰酶浓度的选择?胰酶稀释方法的选择?   [复制链接]

Rank: 1

积分
49 
威望
49  
包包
369  
楼主
发表于 2017-6-30 16:46 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
正在养脐带间充质干细胞,消化的时候用0.05%的胰酶好还是0.25%的胰酶好?浓度低点的是不是比较温和,对细胞更好一些?$ Q' h0 o$ w# |7 J/ U3 }$ {
如果把0.25%稀释成0.05%的胰酶,用PBS稀释好还是用生理盐水稀释好,我用间充质干细胞无血清培养基培养,直接用培养基有点费钱,不过手里还有一点过期的MEM培养基,同时建议用MEM培养基稀释,各位大神觉得哪个又经济又好用?
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 3 + 15 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 3  包包 + 15   查看全部评分

Rank: 2

积分
128 
威望
128  
包包
717  

帅哥研究员 美女研究员

沙发
发表于 2017-6-30 17:16 |只看该作者
我们用0.125%浓度的,直接盐水稀释的
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
499 
威望
499  
包包
1968  

金话筒 优秀会员

藤椅
发表于 2017-7-1 11:12 |只看该作者
生理盐水和PBS稀释后消化的结果差不多。我用的0.125%的胰酶稀释1到2倍使用。. P2 v1 E9 B( m: l
关于胰酶稀释后使用,我不建议使用浓度太低,个人觉得浓度太低后,消化的细胞可能会不容易吹散,传代不均匀。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 15 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 15   查看全部评分

Rank: 1

积分
49 
威望
49  
包包
369  
板凳
发表于 2017-7-3 11:46 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
我用无血清培养加HELIOS血清替代物,感觉不需要太高浓度吧~
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 1 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 1  包包 + 5   查看全部评分

Rank: 2

积分
118 
威望
118  
包包
718  
报纸
发表于 2017-7-3 12:04 |只看该作者
具体用0.05%还是0.25%要看根据你完全消化的时间,消化后细胞的状态来定吧,另外PBS和盐水稀释都是可以的 ,细胞消化所用胰酶买成品浓度及时0.25%,这个消化效果就很好。如果出于资金或者这个浓度消化时间太短,后续操作来不及的话可以选择稀释。我们用过0.125%的,效果也不错。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 8 + 20 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 8  包包 + 20   查看全部评分

Rank: 2

积分
244 
威望
244  
包包
1350  

金话筒 优秀会员 小小研究员

地板
发表于 2017-7-3 14:52 |只看该作者
姨酶浓度不要太低也不要太高   现在大家用的都是0.125%      直接用生理盐水稀释就可以了      省钱实用    效果差不多
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 3 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 3  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 1

积分
49 
威望
49  
包包
369  
7
发表于 2017-7-3 22:41 |只看该作者
怎么判断哪个浓度消化更好呢?
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 1 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 1  包包 + 5   查看全部评分

Rank: 1

积分
威望
7  
包包
85  
8
发表于 2017-7-4 09:35 |只看该作者
rzghc 发表于 2017-6-30 17:16 7 H$ X, ~3 O* q2 Q4 i7 ~
我们用0.125%浓度的,直接盐水稀释的
" S* ]  t: R$ w! m
这种方法看来用的人较多
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 1 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 1  包包 + 5   查看全部评分

Rank: 1

积分
36 
威望
36  
包包
239  
9
发表于 2017-7-5 11:11 |只看该作者
浓度低了消化时间长对细胞也不好;一般我们用生理盐水稀释
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 8Rank: 8

积分
306 
威望
306  
包包
3648  

小小研究员

10
发表于 2017-7-5 16:33 |只看该作者
回复 zuishui 的帖子
! O% n% j6 |: Z* g$ e# n
+ G1 V: s" \6 J8 C8 x* m% w你回复谁 就点击对方回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 像我这样
4 ?  L9 u; M1 r1 y& z  c# I: {, c8 T' \# D+ T
否则他会看不到
‹ 上一主题|下一主题
你需要登录后才可以回帖 登录 | 注册
验证问答 换一个

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2024-5-21 23:39

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.