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happy_noel 发表于 2017-8-25 08:14

单核细胞离心后上清混浊该如何解决？

自己在培养后离心单核细胞时发现在离心管中的上清中总是能够看到很多悬浮的无法离下来的小细胞，严重时细胞呈絮状漂浮。离心前后细胞计数损失很大。自己用400g，5min,9升9降。感觉不是单纯提高离心力就可以解决。不知道是不是因为单核细胞粘性高造成的？不知道有没有遇到类似情况的战友，怎么解决这样的问题？

rzghc 发表于 2017-8-25 08:27

9降。。。

santry 发表于 2017-8-25 08:53

9降太高，最多7降，还有离完呈絮状漂浮的可能是死细胞，可以的话在离心前测一下细胞活率

金鹏 发表于 2017-8-25 09:08

提高离心力没有用的，上清中还是会有一些，那些应该就是死细胞造成的，也存在部分活细胞粘附在死细胞释放的核酸等物质无法离心下去的情况!你可以离心前看一下细胞的存活以及状态，那些死细胞和状态不好的细胞在离心中就会出现你这种情况。针对这种情况，你可能就需要根据你的情况调整一下你的实验步骤和条件，提高细胞的活率；遇到了这种情况，也算是剔除大部分死细胞了；以上仅供参看，个人愚见！

枫之叶影 发表于 2017-8-25 09:19

9降太快了，离心时间可以增加到8~10分钟试试；絮状可能是死细胞，收集前观察细胞状态，离心前测一下细胞活率，检测下细胞生长状态，可能需要调整实验整个过程

剡溪兰客 发表于 2017-8-25 13:25

9刹车太快，降到7就没问题了

随时准备下线 发表于 2017-8-28 10:55

絮状都是死细胞，降速调到6-7，浑浊的话，你确定是细胞造成的？我想问有没可能是其他成分造成的浑浊？比如血小板

cuijiaoyan 发表于 2017-8-29 15:43

之前也遇到类似的问题，你的降速9太高了，降到5或者6吧，离心5-6min就足够了，分层很清楚

cheeray 发表于 2017-8-31 16:21

转速降低一点。时间增加几分钟。   生理盐水多洗几次应该就干净了

gubingxia 发表于 2017-9-12 11:16

洗涤细胞我们一般用升3降5

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