关于脐带消化的问题

zhujiang007

大家都用的什么酶来消化脐带啊？如何建立脐带量和酶量的关系？

wuxiao101325

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还有一种粗放的做法是直接倒掉，但要注意酒精灯烧瓶口或消毒酒精擦拭瓶口防止染菌

xuehu20

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把移液管细头一侧掰断，酒精灯前灼烧使管口圆润，然后吸取组织块，第一次换液要轻柔点，等细胞长出来后就可以拍打培养瓶，把剩余组织块去除了

sign_huhu

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0 a$ j9 `. G: m) ^3 q你可以把移液管掰断 用大口吸
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西瓜太郎

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4 将含组织块的消化液，转移到25cm2细胞培养瓶中，加入DMEM/F12(Gibco,cat no 12400-024)培养基（含15%胎牛血清Gibco, Ref 10099-141），37℃、5%CO2孵箱培养； 4 ]6 h- J8 h5 F2 r) B
弱弱的问下，你的组织块怎么从培养瓶中去除啊？

wuxiao101325

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0.5%胰酶2ml+400~800U/ml胶原酶2ml

清影

最近做脐带间充质干细胞收率不高，而且细胞很杂，原代贴壁不好。各位有没有做的比较成熟的哈，指导一下。

文武庙

好东东，mark一下！

西瓜太郎

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5 {. x! x+ |" v  P4 n6 m+ e! V" d- i. B  I1 g6 M1 d3 z, z
就是4ml=0.25%的胰酶2ml+200/400U 胶原酶II 2ml？是么 ？5 g( X' f* {" J( c/ r1 l6 q9 [

wuxiao101325

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  l8 d% J4 g& s' t2 q1 z. U) k9 W& C分别用PBS配置2*的胰酶及胶原酶，用时等体积混合即可