单个核细胞提取

rmbly

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& D7 \% P' W- f  {9 @( F% C8 G0 f& G请问哪位有提取过单个核细胞，今日提取发现单个核层有红色的东东附着，像是红细胞，有哪位高手知道原因，望能赐教！谢！

tnfsf10

使用淋巴细胞分离液，一般800～900g离心20分钟，吸取白膜层，大多时候会混有红细胞，这个没有关系，只是影响你进行单个核细胞计数。

Robert-A

红色的东东你要分清楚是什么形态，是血凝块还是聚集细胞团？可以选取一些在显微镜下观察下。你若想去除这些东东可以采用过滤和裂解。

kqyy

和标本有关

shihuijunm

目前国内外分离骨髓单个核细胞（BM-MNCs的常用方法是聚蔗糖-泛影葡胺密度梯度离心法（Ficoll-Hypaque density gradient centrifugation）。原理是：外周血或骨髓单个核细胞与血液中的其他成分存在密度差异，利用密度在（1.017±0.001）g/m之间而且近于等渗的Ficoll-Hypaque混合溶液（即淋巴细胞分离液）作密度梯度离心时，各种血液成分将按密度梯度重新分布聚集，血浆和血小板密度较低，故悬浮于分离液的上部，红细胞与粒细胞由于密度较大，沉于分离液的底部，单个核密度稍低于分离液，位于分离液界面上（白膜层），这样就可获得单个核细胞。9 k! p' U6 h! A+ }3 `! ?5 o
请参考

meilin0118

我提过,影响不大。

meilin0118

回复 6# meilin0118 * c. g5 L2 z  O, E( B4 V  f- R
天天报到得的!

chiangmax

有用，支持

小公

回复 rmbly 的帖子1 \7 }# R0 ^: \- S! h% K. A) E

! P; o/ \6 G- I( z( k我昨天提取的脐血的单核细胞，也是白膜层混有红细胞，培养后换液几次就可以去掉

三月桂花香

离心完毕后，离心管内出现明显的分层，由下到上分别为：红细胞层、粒细胞层、Ficoll层、单个核细胞层和血浆生理盐水层。吸取血浆层弃之，直至距白膜层5毫米处