精原干细胞在支持细胞饲养层上的长期培养(英文)

雨中穿行

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# }1 Y" W5 t& D! k# r1 _# uLong-term Coculture of Spermatogonial Stem Cells on Sertoli Cells Feeder Layer in vitro
# C* E! P: t& d* W【作者中文名】 张德迎; 何大维; 魏光辉; 宋晓峰; 李旭良; 林涛;
  M1 _) M! u. |. }9 ~【作者英文名】 ZHANG De-ying; HE Da-wei; WEI Guang-hui; SONG Xiao-feng; LI Xu-liang; LIN Tao Department of Pediatric Urology; Children's Hospital of Chongqing Medical University; Chongqing; 400014; China;
, w1 k: |6 a, q, P6 t【作者单位】 重庆医科大学儿童医院泌尿外科; 重庆医科大学儿童医院泌尿外科 重庆; # n1 }6 P  I! d1 Q, Y4 A
【文献出处】 四川大学学报(医学版), Journal of Sichuan University(Medical Science Edition), 编辑部邮箱 2008年 01期  
4 u& s0 q. W7 v7 C+ o期刊荣誉：中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
; c) Y' L( T- z3 Q- [. Z  n( v【关键词】 生精细胞; 支持细胞; 共培养; 3 }  O3 C7 j  w
【英文关键词】 Spermatogcnic cell Sertoli cell Coculture;
9 M  j  N4 I5 N. P. I0 [1 j【摘要】 目的建立体外研究精原干细胞与支持细胞共培养的细胞模型,研究体外精原干细胞在支持细胞层上的增殖特点。方法应用两步酶消化法,分别从14～15d及6d龄雄性昆明小鼠睾丸中分离支持细胞及精原干细胞,采用免疫细胞化学方法鉴定。将精原干细胞接种在支持细胞层上,观察不同时间点精原干细胞集落形态及数目。结果在支持细胞层上培养24h后,精原干细胞开始增殖分裂,呈双细胞形态;随着培养时间延长,双细胞集落数逐渐减少,而链状细胞集落逐渐增加;培养120h后,链状细胞局部融汇堆积,且细胞集落维持在相对稳定数量。在每4～5d更换培养液的条件下,细胞集落维持稳定状态的平均时间为(51,2±5.8)d。结论精原干细胞在体外支持细胞层上呈集落样生长,并能长时间维持细胞集落形态及数目,可用于体外研究生精细胞增殖分化特征、药物或毒物干扰精原干细胞功能实验。 9 _: B0 \1 G! U% D# T2 `9 j. X: c
【英文摘要】 Objective To construct a cell model of spermatogonial stem cells(SSCs)cocultured on Sertoli cells feeder layer in vitro,and study the proliferation characteristics of SSCs.Methods Sertoli cells and SSCs were separated from testes of 14-15 days and 6 days KM mice respectively by two-step enzyme digestion.SSCs were seeded on the Sertoli cells layer at 5 days in culture.The clones of SSCs on the sertoli cells layer were detected,and cast-off cells in culture medium were counted.Results SSCs began to proliferat... 8 }' X" w' z+ h$ X, ^
【基金】 国家自然科学基金(批准号30672196)~~
( Z% ^2 j& h- M0 \& {6 V【DOI】 CNKI:SUN:HXYK.0.2008-01-003   m3 F2 y) h4 `$ [; c+ C; {
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