干细胞之家论坛 › 免疫细胞治疗专区 › 请教大家冻存PBMC如何才能复苏扩起来?

jiuxuya 发表于 2020-4-18 10:50

请教大家冻存PBMC如何才能复苏扩起来?

冻存密度多少合适?试过1*10的7的密度,结果培养7天都没涨起来,里面有大量絮状物应该是死了.冻存的时候用的CELLBANK商业冻存剂,哪块要注意呢?

jiuxuya 发表于 2020-4-26 00:33

顶!求助啊谢谢大家!

剡溪兰客 发表于 2020-5-7 10:42

慢慢摸，我这里已经摸出了配方

jiuxuya 发表于 2020-5-13 17:43

[b]回复 [url=forum.php?mod=redirect&goto=findpost&pid=5388128&ptid=210553][color=Olive]剡溪兰客[/color] 的帖子[/url][/b]

请教您的冻存密度是多少?一般存储几千万的PBMC

大胖子阿哥 发表于 2020-5-14 15:01

2-5X10*6/ml

chengeng129 发表于 2020-10-8 09:48

1*10^7  复苏后絮状或者结团可能是从死细胞中释放出来的“粘性”DNA分子将邻近的细胞粘合在一起，产生的 可以试试DNase I 看有没有用。或许还有不少细胞。  培养七天没有培养起来可能是营养不够  多加点血浆或者血替试试看

gondobar 发表于 2020-10-10 15:28

冻存密度0.5~2*10^7都没问题，主要是要注意复苏条件，好好摸索一下，直接告诉大家学不到东西;P

碍亏99 发表于 2021-2-19 10:43

我们冻存6*10^7/ml都没问题，两三天就长起来了

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