一个神经球就是一个细胞克隆吗？

dingyx2009

今天在科室文献汇报中，有一个问题大家产生了分歧，由此我有几个问题，在这里与大家分享讨论一下。在神经干细胞的体外培养过程中：
- H  F0 O4 b& v# @一个神经球就是一个细胞克隆吗？
( F5 T; |$ Y7 T. X. t如果答案是肯定的，那根据克隆的定义，一个神经球就应该是一个单一的神经干细胞分裂增殖形成的细胞群体。5 s6 t6 J6 U/ t- [
但我在培养神经干细胞的过程中，镜下观察发现，可能在很大程度上单个的干细胞增殖分裂和/或多个神经球会聚合共同形成一个较大的神经球。如果是这样的话，那就说明一个神经球就不是一个克隆，不是由一个单一的神经干细胞分裂增殖而来的。神经球的这种生长方式又怎么解释？
" ~" |3 t# `/ T' Y# n- O并且还有人提出，如果我说的成立，那相对于在应用实验中，一个克隆的挑选的意义和价值就大大降低。不知大家有什么高见，欢迎热心讨论。

huangzhenbo131

这个问题应该还是有比较清楚的答案的。关于神经球是否是单细胞克隆，那要具体看你的培养方法。首先如果你是原代培养培养开始的时期，也就是刚分离出的原代细胞培养形成的神经球，那肯定不是单细胞克隆。这是的神经球是不同细胞的聚集体，甚至不同的神经球之间也会聚合。如果你再接下去培养，可以对神经球进行单细胞克隆分析。也就是你将神经球消化，再稀释传代，找到单个细胞再进行培养。如果这个细胞是神经干细胞的话，它又会慢慢增殖形成神经球，而此时的神经球就是一个细胞克隆。

ambassador

你这种情况应该是刚分离出的原代细胞培养形成的神经球吧！那就不是单个细胞形成的神经球。

zzdqyaya

huang版主言之有理！

dingyx2009

大家说的很有道理。在这学习了

jennyshy

只有把神经球打散，并稀释成单细胞，对于这个单个细胞如果是神经干细胞那么就会形成一个神经球这个是单个的克隆，不过单个细胞形成一个大的神经球时间需要很长一般要7d吧

guojingjing

在悬浮培养中，一个神经球是由单个细胞形成的克隆的可能性很小。一篇nature method的文章对此进行了详细研究。发现悬浮培养的细胞即使在很低的密度下（传统认为的clonal density）也有相互聚集的趋势，相邻的小的球会逐渐融合成较大的球，这样就无法保证单克隆性。比较可靠的办法是将细胞充分分散后种入metrigel等固体介质中，这样单个形成的球就不会融合，挑出的克隆才能称为单克隆。但是考虑到干细胞在分裂过程中是非对称分裂，总是要形成前体细胞（progenitor cells），这样形成的克隆实际上还是一个异质体。

dingyx2009

回复 7# guojingjing
1 Q% H% ~  ~5 B$ q% @
) k9 @( I4 d; |& h$ Z正如你说的那样我也查到了，2006年nature methodsds上一篇文章，利用连续摄像的方法，确实证实神经球是细胞的不对称分裂和几个神经球相互融合而成的。也就是说它是一个“杂合体”将文章附上，大家共享，很不错的 一篇文章。

luckydog

学习了啊

leedh1223

受用至深啊