请教iPS诱导过程中的问题（有图）

上官鑫

请教各位高手如下问题：（1）mouse fibroblast 诱导过程中，细胞形态会发生变化，慢慢变圆，如图，但是最终不能产生iPS，几次都是这样，而且feeder变的很差。% i3 }6 _% U, A& j' O# D7 J( v
（2）Feeder和media养ES没有问题，如图，但是把诱导后的Mouse fibroblast铺到feeder上，换成养ES的培养基，Feeder不到2天就变的很差很差，不知为何？还望各位高人指点。

573639471

楼主现在还做ips么

linqun

关注:)

上官鑫

media test了放培养箱n天都没有变化，也过滤了试过。我就是不明白feeder用DMEM+10FBS养就挺好的，一换成ES media就变差。

大猪小猪落玉盘

建议：从买试剂开始，从头再来！！！！！！！

iyaofying888

代数应该控制在3代以内，media做一下test，并且过滤一下试试。

上官鑫

我KSR和FBS for ES的都试过

开心果王

KSR对feeder影响特别大，LZ不是用它养的吧！我看见你的Feeder状态不是很好啊！

上官鑫

有道理，但是我用ES media单独养feeder，也是过两天就死了，用ES media同时养ES和feeder就能长的很好，很神奇。

cicadacjk

支原体极有可能在你的293T细胞上，这样你的病毒就带支原体
' q. ^( R. K% ]0 U6 a1 z! y带了Myc的细胞自然长势良好，只是你这个也不能算长势良好，只是能活能分裂罢了，要不然六天必然密到堆起来。如果有支原体是没有办法的，必须换细胞。不要幻想能除去支原体。+ k* x7 h: t& O. \0 v
人的细胞代数大点没问题的，十代左右也就中等效率吧。MEF P4基本不行了。
4 N; y+ `( ]2 s6 g$ y你ES培养基是用FBS吧，没有用KSR吧？一般来说就是用15%的FBS养。
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建议去找株干净的platE细胞，实在不行找一株干净的293，估计问题就能解决了。