请教iPS诱导过程中的问题（有图）

cicadacjk

我觉得问题基本可以圈定以下几个：
1 m7 t( I. D  S+ m4 l( R- u1. 你的293或者MEF有支原体污染，feeder变差就是这个原因，支原体存在基本上是做不出iPS的，必须除去（这个应该是主要原因，其他两个是附加建议）  L4 ^4 F4 [8 P/ ~
2. 你用的MEF代数太老了，一般三代以内，P2更好。
! H5 n$ S3 t& l. r3. PMX诱导，你附加了什么包装质粒，如果滴度高，六天四因子感染的MEF会长得满盘都是，所以包装质粒，转染技术可能都要提升。

cicadacjk

支原体极有可能在你的293T细胞上，这样你的病毒就带支原体; ^3 f& r( l! v# p
带了Myc的细胞自然长势良好，只是你这个也不能算长势良好，只是能活能分裂罢了，要不然六天必然密到堆起来。如果有支原体是没有办法的，必须换细胞。不要幻想能除去支原体。
9 _& m0 A" {: r1 ^  d9 I5 G人的细胞代数大点没问题的，十代左右也就中等效率吧。MEF P4基本不行了。
+ s; F. ~& {4 U6 j) x: w) \( `你ES培养基是用FBS吧，没有用KSR吧？一般来说就是用15%的FBS养。
* a/ s. q* {* w$ R
' ]9 C% L; n2 E1 @0 P0 N建议去找株干净的platE细胞，实在不行找一株干净的293，估计问题就能解决了。