碱性磷酸酶染色

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AKP染色具体步骤：
' v/ E4 W6 _* z* U. i" N& g(1).        配制AKP缓冲液（100 mmol/L Tris-HCl，PH 9.5，50 mmol/L MgCl2，0.1% Tween-20）。3 ^1 b0 k0 ^  b$ o
(2).        从培养箱中取出生长5~6天的hESCs，弃去旧液，PBS洗两遍，加入含7.5%蔗糖的1%多聚甲醛室温下固定30 min。4 i6 u1 ]- J* `
(3).        AKP缓冲液洗涤3次×10 min。
* I% f. J' J0 ^. D8 |! s(4).        配制新鲜的AKP染液：分别取45 μl NBT（nitroblue tetrazolium）染液和35 μl BICP（5-bromo-4-chloro-3-indolyphophate toluidinium）染液溶于10 mL AKP缓冲液中。
" A4 d& V/ M% p1 n' z" M) j2 e(5).        加入染液，室温避光作用约20 min，自来水显色，显微镜下观察。
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