ips细胞出来之后的关于内外源性基因的鉴定

wangyimei

        大家好，想请教一下：就是ips出来之后，需要验证一下我们导入的外源基因（譬如说是导入的oct4,sox2,lin28,nanog)失活而其相对应的内源的多能性基因重新表达，那外源导入的基因
7 L9 K$ ]4 r9 H8 f2 A对应的特异性的引物就是我们导入的基因的片段，我一直不明白的是那所谓的内源性基因的表达所用的引物是怎么确定的，怎么区别内源性的还是外源性的啊？

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外源基因表达引物设计  一条引物设计在质粒载体上 另一条设计在oct4上1 |" u) h$ D: ^
内源基因表达引物设计 两条都在多能性基因上

wangyimei

你好楼上的，能不能说的更详细些，我没看懂

大刀无敌

他的意思说   内源的引物 比如 oct4  你就在oct4上 设计  外源 的质粒 是oct4基因本身+一段载体   你设计外源的时候一段引物设计在载体上这样这个引物就只能检测外源而不能检测内源的了。

wangyimei

啊，这样

rwm

外源基因表达引物设计  一条引物设计在质粒载体上,一般都是启动区上， 另一条设计在oct4上。
+ b- K; K! f; P9 s4 f内源基因表达引物设计 两条都在多能性基因上，一般在5'  或3'非编码区，因为这些序列是不会出现在病毒载体上的，是内源mRNA上的。

wangyimei

恩，好的，谢谢你！

gact

恩，，和我猜测差不多。