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复苏的CSC不成球怎么办？ [复制链接]

amosummer

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楼主
发表于 2011-3-30 10:31 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
年前把养的肿瘤细胞放在液氮里冻存，年后来的时候复苏重新培养。用加了细胞因子的培养基培养，结果养了10天左右，还是单细胞，没有成球的倾向。谁能告诉我这是什么原因？是由于冻存导致的吗？如果是的话，冻存CSC细胞时有什么值得注意的呢？
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lh_kitty

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沙发
发表于 2011-3-30 10:34 |只看该作者
你可以测试一下细胞活度，看看成活率有多少？
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lh_kitty

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藤椅
发表于 2011-3-30 10:38 |只看该作者
我上次冻存后，复苏细胞活率很低。我也查过一些资料，不同的SC培养基种类不同，有血清和无血清培养基冻存液配比也不一样。你可以参考一下一些公司的冻存方法指南，比如INvitrogen的实验手册，我上次看了一下他们关于胚胎干的冻存方法。
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amosummer

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板凳
发表于 2011-3-30 17:02 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
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7 D6 U5 C# l( j" f
2 }; e/ e6 r* n' O( ~) c请问用什么方法测成活率呢: c+ U# J9 K1 j* E4 t  q3 F+ l
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caipan1982

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报纸
发表于 2011-3-30 17:13 |只看该作者
你复苏采用多大的培养密度
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amosummer

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地板
发表于 2011-3-30 17:59 |只看该作者
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, n+ W- A9 k- y: o: S' \  P; E( N- P+ N" C* x% P9 u
请问你觉得多大的密度最好呢？
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lh_kitty

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7楼
发表于 2011-3-30 21:23 |只看该作者
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3 n- u$ U4 ?4 `! `
! v9 N+ N3 ?  C4 g( T' M我上次就用的台盼蓝计数
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