转基因动物原核注射的注射针如何制作啊？

zpzp0312

原核注射时，DNA注射针怎么制作7 j+ v- B- G- B8 y' x9 Z  M! t7 A
是不是和ICSI或者ES细胞注射的注射针制作方法有区别
6 @# W# x# P+ N8 @$ i因为它的尖端开口内径要小很多, J% ~: A/ Z/ V3 h6 [
我外行，一点也不清楚
3 a3 E: R& N1 t3 T# U; S- |我就会做ICSI和ES细胞注射的注射针
: z6 d5 X, s) B, [) fDNA注射针太细，断针时必定会被加热球融化，造成堵塞吧？

yangpan521

不是有拉仪吗?可以设置数据，想要什么样的规格都能拉的出来，建议一些相关资料，这样可以改进，

zpzp0312

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$ \$ ?( }9 d- d& x, l/ @. b6 Y4 o& |( c, K
我的意思是断针，因为针尖内径太小
+ G4 J! \% D. X) f. R断针时容易被玻璃珠融化，堵塞

hualin840518

把断针仪的温度调低一点2 A! M' s4 o- a; L& L1 j; B8 S: e
而且在加热铂丝之前最好不要把针接触到玻璃珠" k% H# z* Y' N) \# _+ G$ F
等温度升起来之后9 [- _8 F  O1 q
在放大的视野中慢慢的把针靠近玻璃珠（在加热之前要调试好加热时移动的针能正好接触到玻璃珠)
# F; M8 L. j% k, b- T然后迅速断开加热的电源4 w. G2 G4 r# v
这样应该就可以了% i! C4 U5 ^" |1 h  R* h! p
不过还与做针的熟练程度有关
$ r) a( U% b/ Y, A# Y我是这样做的% D$ t( q  ^: q0 N6 y
效果很好！

ambassador

1.玻璃球温度调到30°左右，
, I( D8 f6 w1 |8 o6 h9 g' U( V2.将玻璃针调到与玻璃球同一界面（调至符合口径），. L- _$ b2 _# E
3.先踩住，使玻璃球升温，
+ O  p  G5 S8 S( k! v$ r& {4.然后调节旋钮，将针向玻璃球靠近，贴住，$ r5 Q$ z% Q$ K6 a3 W
5.待玻璃针有弯曲迹象的时候（大约5-8s），瞬间移离玻璃针，此时将煅开玻璃针。
( a1 V$ A3 S) f, R% d1 E6 E% s/ L! m# K
如果上面的protocol还不行，只能怀疑是不是动手操作能力的问题了！

xiaomingxu

楼上两位说的只适合核移植或嵌合体用针，转基因原核注射用针不需要用煅针仪来断的，因为针尖部很细（<1um），不适合用煅针仪来断。 但是拉针仪参数一定要设置好，不同的拉针仪使用参数也不一样，需要摸索。参数设置好后拉出来的针直接可用于原核注射，如果有点堵塞或不通可以在holding上轻微碰碰，使口径稍微增大。

cony

楼上说得没错，最近我们在做原核注射，调查好参数拉出所需针尖喇口径后，再烧角度，烧完就可以了，不用断针。在使用时，将针类在持卵针上蹭一下，蹭出一小 口就行。

POPOLD

不需断针  撞针，就是装好针后 ，注射针撞持卵针

zpzp0312

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3 k+ d7 A% I0 k( Z. D3 @  Y9 P/ w* v7 r4 W+ }, n& Q
谢谢
& Z/ s9 c  ^1 {4 ]) H. i看来还是有明白人
" x( r$ W: @* L9 D5 h前面几位说的都是细胞注射针，呵呵

zpzp0312

回复 cony 的帖子) @  n% V8 O" Q* F' N& T
! _  ]. V( U1 y! E, t1 t
谢谢