肿瘤干细胞分化了，怎么办呢？

cyumin123

我做的原代肿瘤干细胞刚开始还可以，后来传代传了一次，就离心后吹打了几下，养到第二天去看的时候小球都贴壁了呢，有的开始分化了，大家碰到这种情况都是怎么处理的啊，请指教啊!

ycjzyh

我养的CSC也会有个别孔出现贴壁现象，但好像不是细胞球贴壁，多数都是单个细胞。" K( z, ~+ S( h8 o6 H1 ^
另外，我的CSC状态不好时我也尝试过将细胞洗出来，放在普通板子加血清培养，细胞球会贴壁生长，但是消化离心后再放在低粘附板子内培养，没有觉得能改善，也许是我观察的不够仔细，反正没发现有影响
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yxc

    细胞不是很多的情况下，没必要分成有血清和无血清两种条件培养，主要考虑到对时间、资源的占用增加，而经过两次转换条件而不一定产生更好、更多的目标细胞，所以我一般将悬浮细胞和消化下来的贴壁细胞放在一起继续在无血清培养条件下培养，直到看到觉大多数细胞悬浮，或者不幸的宣告失败。

cyumin123

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2 t/ W" z' d8 D( h: E1 {! N0 u$ ~# _/ s5 N' q
谢谢你的回答，今天我在丁香园看到有人这样写的：我们实验室里的脑肿瘤干细胞，在无血清即DF+BFGF+EGF+N2的情况下会呈球悬浮生长，但在有血清条件下会分化生长！所以当我们有时候碰到悬浮状态下干细胞状态不是很好的情况下，就加入血清，让它贴壁生长，当贴壁状态很好的时候，把分化状态的细胞消化下来，离心弃上清，再加PBS漂洗，离心弃上清（即把可能致干细胞贴壁的因素去除掉），后转移到无血清培养基中！干细胞照样能悬浮生长，而且这样能使干细胞状态变好！0 v* @" u# ^3 _# t9 [
  所以我觉得我的细胞贴壁了，但不是分化，请问你们是像上面一样处理贴壁的细胞球的吗？还有我想做分选，原代分选阳性率很低，是否可以将球传代几次后再进行标记分选？

yxc

   我也遇到过，据我分析，是细胞尚未纯化，目前常用的选择性培养基不可能从肿瘤标本中一下就能分离出干细胞、而淘汰掉肿瘤细胞，必然夹杂有肿瘤细胞，所以传代后贴壁，只有经过一定时间的培养、多次传代、逐渐消除掉肿瘤细胞及其他细胞，剩下的才是肿瘤干细胞，所以成功率不高。加油！

cyumin123

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( w! q2 t$ r1 K+ G- y! s- w; Z
7 E& M1 a) i! }( O& H. v是自己取标本做原代的，要的是干细胞，现在球的状态是贴壁了，球周围有枝丫冒出，怀疑是分化呢，因为当初做神经干细胞原代的时候也有出现这种情况呢。

天依耶稣爱你

一个可能就是不是肿瘤干细胞。请问你们的肿瘤干细胞是买来的。还是自己诱导出来的呀？

monk125

挣个积分真难 不想要了

monk125

dish 用的是贴壁的那种吧？？分化。。。。。。这个我真要厥过去了  不过说不定是一伟大发现 持续思考和关注啊

yzwongoing

楼主v5，求图片上传下看看，我很是好奇。。还有楼主养的是什么肿瘤细胞？
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