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[请教] FDA/PI双染的问题 [复制链接]

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包包
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优秀会员 帅哥研究员

楼主
发表于 2011-8-17 07:52 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
FDA/PI双染时,目镜下看FDA的绿色荧光很强,计算机拍照出来也很强;. W" x6 K6 e3 d  F: F) c* i
PI的红色荧光目镜下看也比较强(但是比绿色荧光要弱一些),但在同样的曝光条件下,计算机拍照却根本看不出来~~
5 |) \& ?) Q8 _" n2 V为什么会出现这种不一致的现象??不知道是以眼看为准还是以拍照结果为准,计算机软件出问题了还是做什么了校正~~不过个人感觉死细胞不至于那么多,为什么红色荧光这么强?
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沙发
发表于 2011-8-17 09:23 |只看该作者
坑定是拍照的为准啊
" X# g8 s% C4 B) q) y  G; U+ h( ~
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金话筒 优秀会员

藤椅
发表于 2011-8-17 10:42 |只看该作者
显微镜调试一下,把不必要的光栅全部撤出。软件的曝光值以最弱的光源来做标准。加入对照组来判定荧光强弱。
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优秀会员

板凳
发表于 2011-8-17 15:21 |只看该作者
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1. PI染色时间需要严格控制,不能太长,否则容易出现假阳性。4 p) w+ L  c7 y5 ]+ h) r
2. 显微拍照的原则是以镜下看到的为准,而不是以软件。
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报纸
发表于 2011-8-17 15:53 |只看该作者
同意楼上两位
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