肿瘤干细胞培养基

goodboy

我看到的肿瘤干细胞培养基一般为DMEM/F12+hEGF+bFGF，不知道适合筛选K562等悬浮细胞中的胚胎干细胞吗？

Jordan

干细胞培养基配方：1000个细胞/ml无血清DMEM-F12（Cambrex）培养基，添加10ng/mlbFGF、20ng/MLEGF，5ug/ML胰岛素和0.4%牛血清白蛋白。

goodboy

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; m7 E% v) Y# T' _" N3 p% S5 |) Q1 S/ ^
谢谢，我们实验室是在DMEM/F12+hEGF+bFGF基础上添加B27等，筛选出来的肿瘤干细胞都是悬浮型的，由于K562也是悬浮形细胞不知道怎么区分啊

goodboy

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9 ]3 p9 k! J8 Q1 g. U
' [' P9 Y4 t* ^( Y看到你的配方感觉有些不对呢，胰岛素作用是促进细胞分裂及分化的吧？这样的话肿瘤干细胞都分化了，还谈什么筛选呢？这只是个人意见

Jordan

是，很多都有加B27。胰岛素在这里和BSA一样都是一种营养因子，也有加肝素的。具体见附件

goodboy

回复 Jordan 的帖子5 Q6 V( X' b' g+ {

/ \. N" B/ k+ s$ z3 a4 }: Z5 _. Z没见到兄台的附件呢，请问在哪呢？

Jordan

肿瘤干细胞培养经典文献!

goodboy

回复 gzw874505837 的帖子
/ Q% ]' W. Z" L7 ?* q5 i4 {8 x- N# x
之前养过，用的1640+10%FBS+PS
; Q9 x7 X3 p1 m7 F# Q7 ]4 z

mike19840320

胰岛素是促进葡萄糖代谢的吧

yxzxlmlf

回复 goodboy 的帖子2 B. G* T; l+ K5 r3 c0 m
7 X" d. s, A& d& Q! ]
你好，请问一下您那边是怎么传代的啊？我是1500rpm收集微球体后用PBS洗一遍，然后再离心去除PBS  加0.05%-0.53mM EDTA消化 然后就不成球了