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二、关于胚胎干细胞、iPS细胞特性会议发言：
! b! G# ~# r0 S5 _& J5 m1 a1.周 琪，中科院动物所研究员
! g8 D0 F; V- }4 J# M# \* v; a题目：iPS细胞发育潜能及安全性评价
8 A4 j8 f, B6 N（1）开场白继续回忆几年前听干细胞报告人如何少，现在的听众如何多（听过周琪多次报告，几乎每次都提到此事）。提到973首席今天基本都参会。
. H3 C% ^+ g$ A- E/ t（2）发育潜能的评价指标：核型的检测，体外传代能力、体外分化能力，体内传代能力，形成嵌合体能力，四倍体补偿能力等。通过四倍体补偿回答了iPS多潜能性问题。7 g: w% g& b3 ]
(3)对iPS致瘤性的研究几乎都是来自于嵌合体。继续回忆“小小”鼠的工作。* i, G6 b8 r. P' R+ k
（4）IPS来源的动物发现肿瘤的发生，而这些肿瘤都可以检测到外因子的表达。这些外因子的插入可能是肿瘤发生的元凶。
! B, n5 M9 B7 X: V2 W0 Z$ z D（5）检测几种不同方法得到的ipS，如C-Myc free，Oct4单一诱导的IPS，研究发育的比较。是什么决定这些不同来源细胞的发育功能目前不清楚。8 N( S& _$ s5 h# w- a' H
（6）向神经干细胞转分化的工作，评价其安全性。
: l* X1 V8 a: J6 }8 f（7）介绍去年发表在JBC关于miRNA的工作。5 Z8 V; W& J0 {+ S) G* ~
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2.裴端卿，中科院广州生物医药与健康研究院研究员5 p! b5 H- ^2 ?
题目： Reprogramming: A look at Vitamin C
# d/ `3 F5 {( U/ D& B; d9 N" I（1）回忆过去10年所做的工作，研究Oct4调控ESC的网络，转录因子间作用等。非选择性iPS诱导系统。7 I# G Y" t) F5 I/ z* {
（2）与张毅等实验室合作，发现维生素C通过组蛋白修饰增加体细胞重编程，通过减少H3K36me2/3水平影响重编程。文章近期将发表在Cell Stem Cell。
4 T8 }* D1 i( x: G（3）维生素C通过影响Jhdm1a/1b基因发挥其作用。
/ N, r, |8 k+ q0 N4 M: M& x! O$ U（4）用单因子Oct4可使细胞重编程，3个实验室：丁盛、邓宏魁和裴端卿同时发现这个现象。但效率很低，改变H3K36me2/3后可增强单因子Oct4重编程的效率。
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& x1 L4 l9 y- `: A; Z, W2 n: ?) E; J) D3.高绍荣，北京生命科学研究所研究员% M2 I1 r$ T( I M
题目：IPS：Molecular Mechanism and potential application
/ m3 v7 `" @8 n0 T( Y0 R/ [（1）理解IPS多能性和机制方面的工作。介绍四倍体补偿实验。使用的是inducable vector进行iPS制备。使用小鼠脂肪细胞进行reprogramming，获得的iPS进行四倍体补偿实验。四倍体补偿获得的小鼠的脂肪细胞（或者血细胞）再制备iPS，然后再进行四倍体补偿，连续进行了6代，以证明iPS的全能性。
: r7 t+ ? ^+ }6 u(2)使用RNASeq、miRNA-Seq、ChIP-Seq H3K27、DNA methylation-Seq等方法，分析不同代次、不同来源的iPS，以研究其DNA甲基化等表型的差异性。
v. `8 f' v1 q* Z( |# V$ e(3) 介绍用iPS治疗疾病方面的工作。以beta地中海贫血（阴性遗传单基因疾病）为疾病模型。8 L8 q' ^. T. ^' I
(4)使用同源重组方法更正iPS细胞的突变基因。比较更正前后基因表达谱的差异。分化iPS向造血细胞分化。证明基因打靶可以修复某些遗传病。 [" e4 F6 R l$ ]4 B e
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4.邓宏魁，北京大学生命科学院教授7 P$ h2 ?3 C- h; I# ] F6 q* {
题目：建立多潜能干细胞以及向胰岛分泌细胞的定向诱导分化
& e4 ?, ^! y1 `6 G（1）建立iPS时，使用CMV启动子drive EGFP，若局部区域无GFP表达，提示该部位细胞发生重编程，因为CMV在ESC中沉默，不能驱动GFP表达。
; \) M+ \1 C- M1 x. [2 P9 ^（2）建立一个新的人iPS基因组合：Oct4、Sox2、Klf4、UTF1，后者是新的重编程因子。发现P53是体细胞重编程的主要障碍。) W# o5 w3 o6 G! D4 e+ B
（3）小分子化合物筛选导致重编程的分子，包括组蛋白去甲基化抑制剂、组蛋白乙酰化抑制剂等。同时抑制重编程的主要障碍因素能增加重编程效率。
* a3 U- u$ |1 \, ^1 G（4）建立单基因Oct4诱导重编程体系（Tet-On Oct4）。建立新的vector free和高效的重编程体系。9 G5 }3 q4 y) }* Q: _- \2 k
（5）诱导ES向胰岛细胞定向分化。建立大动物猴子iPS和疾病模型，进行糖尿病大动物实验。! i! I3 K) n: B4 H7 [5 e6 s9 }
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5.金 颖，中科院上海生科院/上海交通大学医学院健康科学研究所研究员
' Q u- H+ a, O; }! m1 r$ R题目：转录因子Oct4蛋白质泛素化修饰与多能干细胞分化和体细胞去分化。
; Q2 i7 T$ l- ?, o! v1 k1 k- b（1）过去10年一直研究与Oct4相互作用的蛋白质和它所调节的靶基因。Wwp2蛋白泛素化酶，能泛素化Oct4，也抑制Oct4转录调控（2004年发表在JBC）。; I. Y& O. `: D4 Q/ t
（2）Oct4也被SUMO-1修饰。7 O$ j4 N7 M& V0 |& ]- r
（3）研究Oct4被泛素化修饰后的作用和结果。
$ H# n9 U& a+ d7 U: O# `; `! V（注：金颖老师此次终于没再继续讲“如何建立人的ES细胞系”。）
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: x% [; d/ J) n& Z% L+ q8 T M6.肖 磊，浙江大学动物科技学院教授% `* o2 l$ p+ D& |; l% W
题目：ES/iPS细胞和转基因动物研究7 g0 H+ y7 H% Z2 ?4 f( k* }* p( Y
（1）建立猪iPS和利用猪iPS建立转基因动物模型。
& `- Z3 P/ |* i2 X$ |* N（2）介绍小鼠Knock-out过程。因某些动物无ES细胞，无无法进行基因打靶工作。介绍建立大鼠iPS工作（已发表在Cell Stemcell）。
) a$ V+ P: X( t* ^0 O. i3 P" W$ r; a（3）使用可诱导性vector建立猪iPS，并进行鉴定。使用猪iPS制备嵌合体猪需时间较长，故使用核移植方法建立。5 x3 j. C7 g" T$ Q+ U
（4）全国多个实验室建立“猪的联盟”，共同研究猪。已获得嵌合体猪。9 F% F0 P2 p% x: Q# P8 G9 i
1 i8 R3 b7 o" p/ f [7.卢光琇 湖南医科大学人类干细胞国家工程中心题目：各种遗传性疾病的干细胞建库向血小板诱导分化
. [! g! _3 Q5 q. J（1）已建立285个人ESC细胞系，是世界上最大ESC提供种子细胞库。每年进行试管婴儿1.3万，今年进行了1.8万。/ L, \1 I [+ ~2 @$ u/ B+ c k, ]8 c
（2）与骨髓库相匹配，有600个ESC可满足湖南7000万人口需要。# [9 ~( B. w0 Q" ]
（3）使用iPS细胞进行遗传病研究，重点是血小板无力症。
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发表于 2011-11-14 17:47
