求教睾丸微注射实验

huozhicb

小弟想做一下睾丸微注射，想向大家讨教一下：+ l3 X! C1 C6 l5 D; o
我的目的是利用睾丸的微环境诱导干细胞向精子分化，要将细胞注入睾丸中。想请教一下专家以下问题：
& ?9 y" M. c/ ~/ p/ b  c. L( P+ n1、注射针的参数具体是多少？. m7 ~8 T2 K5 L" |
2、注射位点是哪？我看了一下网上的资料，有注射到曲精细管的，也有注射到输出小管的，具体哪些位置比较合适呢？
5 k- k/ d, k) U2 ]3、我之前试了一下，感觉难度最大的就是将注射针插到曲精细管里，各位有什么诀窍吗？+ W: I: W8 {: n; e; @( }. X
谢谢！6 [5 z3 P" y- E0 T8 p% r3 u
有相关资料的话，请不吝上传！

zijunqin

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3 @% J' p1 O$ T0 p  Fpup 是小狗吧

w343989328

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/ }4 ^, W. S" E; D  |/ H
呃，我说的pup是指10d的小鼠。。应该没错吧。。。谢谢你，我先去尝试过再来讨教

zijunqin

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4 K) Z( a* @$ w2 `
" _& ?6 c5 Q) Y: d" I3 P10d 使用avetin 0.4ml/25g 麻醉可以，5D建议冷冻麻醉；解剖横切和纵口我都试过，都可以，建议纵口；缝合后睾丸归位，pup?很高端啊！ 我没做过；孕鼠注射白消安需要摸浓度，过高造成流产，我已试过30mg/kg,流产，建议降低浓度尝试

w343989328

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: H2 l) A8 {7 [& r$ O9 g
我想问下，10d小鼠注射的话，是用冷冻麻醉吗？解剖时是剪个纵口，缝合前要让睾丸归位吗？我们移植的不是SSC，我担心移植进去的细胞竞争不过内源性SSC，不知道选择pup作为受体合不合适，有老师说可以在母鼠怀孕时注射白消安，但我没找到文章，不知道可不可行、

zijunqin

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* i% \7 A- s5 p' v' O
不知道为什么不能加你好友  你就留言吧  就是有时差可能不能及时回复你

zijunqin

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) B2 U6 o4 r+ ]( w  W
/ x8 R: S" \1 L' X5 ?进针是由睾丸网，WT和nude mice 都打过 多打就熟练了

w343989328

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  P  V( i' L$ o
1 a& y( E& e! y请问你是从那个部位注射进去的？曲细精管、睾丸网还是输出小管？c-kit mutant的mice还是WT的？

zijunqin

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; ~& H- A! C  A: D' g4 J# u3 P( ?
1 z! x. B7 v: T* p10天的比较熟练  5天的成功率低些  普通体视镜就可以了

w343989328

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# y% N/ \4 r# v2 t; ^4 R8 b1 O2 H  R! @, L7 h3 \" C
你能注射进10d小鼠的睾丸吗？需要显微操作设备不？