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【提问】请教一下为什么人胚胎干细胞用胰酶处理之后容易死亡?   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2012-4-25 11:42 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
如题。请各位高手说一下可能原因是什么。
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优秀会员 金话筒

沙发
发表于 2012-4-25 17:42 |只看该作者
可能细胞间通讯比较紧密,单细胞状态不利于生存
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藤椅
发表于 2012-4-26 09:03 |只看该作者
会不会是消化过度啊
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板凳
发表于 2012-4-26 13:56 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
消化传代肯定有自然损伤,消化时注意不要消化过度,消化终止后尽快接种。
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金话筒 小小研究员 帅哥研究员 优秀会员

报纸
发表于 2012-4-26 14:06 |只看该作者
楼上说的很有道理,你消化的时间不是一成不变的具体情况具体分析,消化的温度、终止液添加量都是影响因素。
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地板
发表于 2012-4-26 14:13 |只看该作者
应该是处理时间长了!
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金话筒 小小研究员 帅哥研究员 优秀会员

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发表于 2012-4-26 14:17 |只看该作者
回复 孤独剑6639 的帖子
* s$ S( t2 ^: n+ R7 S' d% G' o/ D; b8 `5 C
还有一点,消化完了要吹打下来,这个要轻柔不然对细胞损伤很大,细胞不是吹打下来的是消化下来的。
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发表于 2012-4-26 15:35 |只看该作者
本帖最后由 ygrg 于 2012-4-26 15:40 编辑 . `/ K# }3 J, c+ C+ a$ n
7 y& R: ?6 b" A$ y
有说法是,人胚胎干细胞不能消化成单细胞传代,否则会启动凋亡通路
: m$ l5 z; f3 H+ S. N  G9 }* [- u* Z* l
相关信息见 http://www.bioon.com/biology/cell/455036.shtml,“当人类多能干细胞分散成单细胞时,NMII启动细胞发生凋亡。”
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发表于 2012-4-26 16:18 |只看该作者
hESC不能消化成单细胞,如果一定要成单细胞后再贴壁,建议加一点ROCK inhibitor
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发表于 2012-4-27 09:12 |只看该作者
回复 rogers0929 的帖子) y4 [5 u! l0 r4 j+ v
! {# z7 C) G$ }* ], p. P9 @9 e8 b
我们做的胚胎干就是用胰酶消化的,你的胰酶浓度是不是太大了,或者是消化过了,凋亡率测了没?
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