有关BRDU标记的一些问题，求助中

superlamp

第一个：
5 \0 C0 T4 }+ D3 q* X$ w1 U3 t$ T近期本人所在的实验室在做神经干细胞移植方面的内容，对于移植细胞，我们采用了SPIO磁标记，但是现在发现一个问题，如题，我们想观察移植后的NSCs是否增殖，应该采用什么方法呢？如何区别增殖的cell是来自移植而不是自体的呢？请各位大大帮忙分析一下。4 j+ l; ]& k. [* |
我们已经通过免疫荧光的方法观察到BRDU标记的增殖细胞，标记是在NSCs移植前进行的！0 h) r& m( {" Q# H
这样可以说明增殖的是移植细胞嘛？7 }4 w) U" p' d# ?5 }

. _$ s0 \1 d/ `0 d, b& v* ?第二个：7 Q1 K* w2 @& o: @
如果体外标记后的细胞增殖生成新的子细胞，按照半保留复制的原理，是不是应该还可以用免疫的方法检测出来呢？
) @* T( O' Q( g& ~0 ~% {6 D

superlamp

或者说在体外标记的时候，有部分BRDU进入到细胞质中，在下次分裂的间期可以掺入嘛？

cortex

如果你是在移植前用BrDU和SPIO同时间标记的话，二者有什么差别呢？SPIO同样可以组化检测啊。同样面临细胞分裂带来的种种问题，同时你可能还得考虑细胞融合的问题。我觉得这样做还是不完全对。

superlamp

回复 cortex 的帖子# f. g& {5 b8 `8 s3 ?

, P+ S+ _& B9 c$ g# B请问你所说的细胞融合具体指什么？

superlamp

嵌合作用？

wgmzky

你可以用荧光来标记细胞  用病毒感染NSC   如果楼主有此方面的经验  谢谢分享下  本人最近攻坚NSC的感染标记  到时候可以交流下

superlamp

回复 wgmzky 的帖子
7 d8 `" R) k; m! d
4 M5 a- y# s% o! j) VGFP标记率太低，我尝试过一小段时间后发现细胞死亡率太高，就放弃了，也就是个20%能活着，后来才改的方法，不知道你现在做得怎么样了？

superlamp

用brdu标记细胞后,再增生的细胞会不会还有这种标记?

cortex

现在不是有现成的GFP标记神经干细胞买吗？你可以直接买啊！神经干细胞转染应该可以，转染后流式筛一下，应该可以用吧。所说的细胞融合是指你移植的细胞可能和宿主细胞发生合并。再者，移植的细胞如果死亡，可能被宿主细胞吞噬或摄取，所以这样做不够准确。

wgmzky

回复 superlamp 的帖子+ {- B$ j) O2 y$ h

6 \3 `, @' i4 X4 M) ?! H正在进行中  如果你持续关注  我到时候会把结果告诉你  如果行不通 到时候还得向你请教Brdu标记的相关细节  还望指教