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干细胞老化表现:& @% K+ o Z q/ l- V. ~
①细胞胞浆内特别是在核区附近出现黑色颗粒,表示细胞开始出现老化;+ h( V7 a8 j' j6 ]
②细胞胞浆内出现空泡,则表明该细胞已老化或者已经开始分化(在全部细胞中出现少数老化细胞是正常的);! ]' }$ T4 _! k5 y6 K: z" I, r+ H
③细胞立体感逐渐消失,细胞间的间隔不清,部分细胞扁平状,细胞的形状趋向多样;
2 Z9 [- r5 q! @# j6 C④贴壁性减退,出现一些漂浮的细胞;
+ ]" B1 L/ ?; S" ]⑤部分分泌强的细胞分泌物增多,细胞表面会比较脏;0 I# N; o2 {9 l0 ]
⑥细胞增殖速度明显下降,分裂相的细胞明显减少.
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干细胞老化的原因和预防:% q! a7 |: S6 D* |5 R$ ?# V# A
①接种密度的影响:部分干细胞具有一定的分泌性能,能够分泌一些对细胞有支持能力的因子类物质;所以必须维持一定的接种密度,否则会导致细胞增殖减慢,最后出现老化;4 p! N3 ] C3 X3 x* b# ^; ?
②消化过度:消化细胞时会对细胞的表面蛋白有较强的损伤,所以消化的时间不能过长,使用合适浓度和pH值的消化酶,否则会导致细胞老化和分化;/ k* q9 u( D# q9 C4 _
③合适的密度的时候就要传代:细胞如果过密,接触抑制作用会导致细胞的活力减弱并影响增殖导致老化;% d! a; G. c; ^4 t7 K' b5 a
④使用合适的血清和培养基:不同的干细胞对培养基特别是血清的要求不同,所以使用不同的培养用的血清进行筛选,寻找最适合该干细胞培养的血清是预防细胞老化,维持细胞正常生长的重要保证.
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