单个核细胞分离无白膜层原因

zhuzhentulip

        我用15ml离心管分离5ml稀释全血（1：1）Ficoll分离液2.5ml，稀释全血与Ficoll分离液的比例是2：1，2000转20分钟离心，能得到较清晰的白膜层。后来我要分离50ml稀释全血的单个核细胞，分为4个15ml离心管分离，每管加Ficoll分离液2.5ml，稀释全血12ml左右，2000转20分钟离心，这样经常得不到白膜层，偶尔可以得到白膜层，是不是Ficoll分离液太少了啊？是不是Ficoll分离液与稀释全血的比例要1：1到1：2为宜呢？" Z" y; ~/ v! W0 [) `$ i- D+ }
    如果用50ml的离心管来分离单个核细胞可以不，有人说液面大了分离效果不好，如果我用2支50ml的离心管来分离50ml稀释全血（1：1），每管25ml稀释全血，加到12.5mlFicoll分离液面上，Ficoll分离液与稀释全血的比例为1：2，2000转20分钟离心能得到较清晰的白膜层呢？

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2 Z  ?3 t1 e# j0 |4 N) x8 J$ S谢谢你的回答

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5 c/ g. J( D0 h6 [# G' O  A. `, a: p7 h: m# B
我们还是把减速设的0

zhuzhentulip

回复 莫邪小仙 的帖子
9 y0 M) V" `% ^- N9 [& j) l+ r8 Q* C
& C7 i$ z* g4 k. A1 T实验技师给我们说的那样加Ficoll，但我在网上查了，也看了说明书，上面都是说的1：1或者1：2。所以就纠结了。

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回复 莫邪小仙 的帖子1 a3 S- A* O7 ^' _# ^7 O; t9 z

% |* X9 A, J* q8 r6 o* P9 |4 f我明天就按12.5mlFicoll加25ml稀释全血用50ml离心管分离试试，我想应该可以的。

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回复 Jonathan 的帖子, A7 H6 G4 F. i  P+ |
5 E3 m' }+ M2 S% g' x$ P% p" t* S
好的 明天也试看看

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( Z: a# k7 G' d& B* R
# y8 R+ U, @& U我试过了，这样分离后白膜层很明显，谢谢你，我们还是用的Ficoll（天津灏阳）