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楼主: 倔强的投手
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细胞是污染了吗?     [复制链接]

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包包
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发表于 2013-2-1 08:40 |只看该作者
有些板子各个孔之间是有差异的,我遇到疑似污染首先会看培养基颜色是不是很快改变,其次是有没有肉眼可见的漂浮物,再就是高倍镜下观看是不是有一些小黑点在运动。一般的污染也就是细菌,霉菌,支原体污染,都很容易辨别的。个人建议:不能排除是污染造成的脱落情况下,细胞要迅速处理掉,避免污染其他的细胞。
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发表于 2013-2-2 05:04 |只看该作者
回复 加贝 的帖子
. ]3 x) h  L3 b$ K4 D* @+ @# h( T; n5 M6 [; a
但是如果污染的话,同一批的细胞应该都是这样的,同一个孔里面应该也都会污染。、
' V  y  d5 j7 R但我目前的情况是,并不是每个孔都这样的,而且同一个孔里面,也并不是所有的细胞都这样,只是有一部分脱落。 问别人,分析可能是板子里面落东西进去了,所以倒是细胞贴壁有问题,然后就飘起来,然后,就没有然后了。。。。
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发表于 2013-2-3 00:24 |只看该作者
从第三张图看,我个人觉得是你的培养基时间放久了,谷氨酰胺过分降解导致的细胞边缘卷起。这应该和细胞分化是两回事。然后关于细胞密度的说法我有些不解,诱导事不是建议细胞铺满后再养2d,让细胞退出生长周期再诱导么?
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发表于 2013-2-3 04:54 |只看该作者
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回复 mirrida 的帖子8 c0 W" b4 A% v7 f  x  D

& x& V) O" a% Y' }/ Q  u这个。。。应该不会吧,我们实验室用的L-Glu都是分装好零下20度保存,用的时候放四度融化,一直都是这样的,别人的细胞也没见出现这种情况啊。    关于细胞密度,之前倒是听说必须长满才能诱导,但每个人的做法还都不太一样,有的70-80%汇合就开始诱导了
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发表于 2013-2-5 10:54 |只看该作者
细胞状态确实不好了,感觉很久没处理了的一样,另外有些板确实会有问题,在传代后出现细胞的成片脱落,跟细胞的类型,细胞代数,板的质量,消化时间,吹打力度等很多因素相关。
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发表于 2013-2-5 11:06 |只看该作者
诱导分化一般在细胞长至60%即可开始,长满再做肯定是不行的。
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