求助 人ASCs?

cartoonyang

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5 S! m' L4 |0 b& J$ W
我们现在正在分离人的脂肪干细胞，目前是在做表型检测。买的是ABCAM 公司的一抗，CD90，CD73，CD105，还有HLA-DR, CD45. 还有买了Invitrogen 公司Zenon 的二抗进行标记，过流式，但是做了很多次（P2-P5代）都检测不出来。由于没有经过检测的人的ASC做阳性对照，目前无法判断我买的抗体是否有效。所以来这里求助大家；另外，如果哪位有经过鉴定的人ASC细胞，如可以赠送更好，如不行，本人愿意购买，以此检测所买的抗体是否失效？谢谢！" w' i& g& o2 m: O3 R8 q% N- G

wind789

cartoonyang 发表于 2013-2-1 15:18 3 ^8 B. s6 q7 p( h) g* b& `/ K  Y
我们现在正在分离人的脂肪干细胞，目前是在做表型检测。买的是ABCAM 公司的一抗，CD90，CD73，CD105，还有H ...

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cartoonyang

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非常感谢wind789的热心的回复！！！

ditiger

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0 n# k" b2 b4 }( q5 M8 v9 c5 e+ ]/ n6 W. s: A( |2 X$ X
一般是BD的抗体较好，而且一抗代荧光。2 ?2 ^9 M7 f7 M% G) v" ^+ P. u
ABCAM的抗体不发光么？需要加二抗。。。贴出货号，大家看看。

cartoonyang

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* O: V5 f1 X! j/ J
抗体            货号                   公司- s4 q. S9 u! E! y* \/ I
CD105            ab2529                          Abcam  c/ q. S  {/ N0 y% U8 I
CD73           ab81720         Abcam
8 D) f; g' V3 XCD90            ab225                         Abcam
# B: Y# ^4 K/ NCD45           ab30470          Abcam
- y. a0 r) P$ l! B1 @IgG1 control        ab18447        Abcam- b  P/ i1 @0 R7 z8 Q) x
IgG2a  control        ab91361        Abcam2 C% F& b  D4 V; {8 I. _$ b  z
Alexa Fluor488        Z25002        Invitrogen7 g6 |8 l1 ?" w
R-Phycoerythrin(R-PE)        Z25055        Invitrogen
( K- b6 `+ A7 S* c8 N, k1 s
' R0 \: V3 m6 c1 F8 E检测CD73，90，105都是阴性，真是奇怪。后来问医科大流式细胞实验室的老师，她说，在国内条件下最好用带标记的抗体。

s02260441

下列是我们用的抗体，确认都可以染的出来，我也认为确实是使用自带标记的抗体比较好进行分析。
0 ?/ I. Z9 C- H! G3 g
& c( p, z! V0 T" E7 _1 \7 jInvitrogen:
* j# l( a. U/ s) t1 w% D0 FIgG1-PE  MG104
1 Y& z$ J+ _6 c0 Z! [) M  DCD34-PE CD3458104/ R% Z, @8 h: ^
CD45-PE MHCD4504
; e, |1 |+ g% x/ t% dCD44-PE MHCD4404. h, G# a* C, T, v8 q

/ N# w4 ?2 V; O1 ^1 LBD:3 }# }9 [* K% _2 `. j: U6 B
CD73-PE 550257
1 ^( }; @3 a& t: {/ ZCD90-PE 555596

cartoonyang

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" K( s% g" r. t' u- E. P8 h5 V
谢谢 告知！！！