请教CIK培养过程中出现的絮状物问题！！！

lyj-0017

我们是采用血液分离机分离外周血单个核细胞，然后加入培养袋中诱导培养CIK，这种方式采集的单个核细胞量较大。
/ O$ p6 n8 V6 K& C1 H5 q* R我们在培养过程中发现，贴壁后的悬浮细胞转入培养袋中后第二日，或者加入培养袋后两三天后，在培养袋中会出现很多絮状物，我想问的是大家有没有遇到过这种情况呢？大家也帮忙分析一下原因吧，附图片见下。

shy-shen

你这个应该是采血时用的抗凝剂的问题 ，一般用肝素就好了 好像枸橼酸钠就会导致这样

chslyx

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# C" A% \! G/ u! a1 L# B2 I5 q: T. Z, ~$ `
有两种情况，第一可能污染了，第二就是培养基营养成分不足导致细胞凋亡，建议分袋补液试试

地球外世界

回复 lyj-0017 的帖子* w2 T4 \  N# h3 A+ m* u
5 @8 g3 H9 y- Q" j! ^
实验阶段

lyj-0017

回复 地球外世界 的帖子9 s; k: }: t$ h! D2 f- S
4 R7 \8 f  o, p  F. V, L
CIK又放开做了？

地球外世界

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3 Y5 d' X! h2 p+ a0 X; f+ ?
* `! f, f- Z5 ^9 O& {2 p" A最近培养的几批也有这种情况，接种细胞初期的几天，细胞状态都还不错，7d左右慢慢就会有絮状出现。把细胞悬液中细胞重新倒入50ml离心管中稍许沉降，絮状沉底，取细胞悬液，重新转袋，转好，但增殖还是很慢。

地球外世界

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' s" S9 ^6 h" [# N  T
4 b& f: A) r: x; Z0 e9 ^初期还好，培养到第11天，出现这种“细胞团”，是不是正常？

阿秀哥

照片拍的不够清晰，看不出什么情况来

liuyanly35

你得在显微镜下看，如果是丝状的就是霉菌。肉眼看一团一团的像鼻涕就是死细胞。

Llxue

有没有可能是红细胞呢，我之前又一次分出来的免疫细胞含有比较多红细胞，养了几天红细胞凋亡就有点像这种