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PBMC掺杂红细胞会如何   [复制链接]

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楼主
发表于 2013-6-25 08:32 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
在吸白膜层的时候吸入过多的红细胞,在培养的过程中会遇到什么样的情况呢?因为脐血红细胞很轻,比较难彻底的分离,有时会掺杂较多的红细胞,大家遇到过没有
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沙发
发表于 2013-6-25 11:06 |只看该作者
如果掺杂少量红细胞,是没问题的,不影响到白细胞的分裂和增殖,到一定的时候,红细胞自行裂解,最后收细胞的时候没有什么红细胞了
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藤椅
发表于 2013-6-25 11:17 |只看该作者
回复 流泪的鱼 的帖子5 W) L9 `3 G7 Q
4 |" r4 b: ?* A$ M# P6 _
要是参杂太多呢

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板凳
发表于 2013-6-25 12:38 |只看该作者
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回复 easternliu 的帖子
/ b- c& I% F' }  w0 E" ?0 [9 m' E0 i( B2 q
你可以用红细胞裂解液去除红细胞
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报纸
发表于 2013-6-25 14:32 |只看该作者
回复 yaolinzhang 的帖子/ G7 ?6 J' a5 q  M& @0 y
6 G6 ]) T7 R2 p. g0 i$ p
我想知道的是,过多的红细胞对PBMC培养的影响。

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地板
发表于 2013-6-25 15:12 |只看该作者
回复 easternliu 的帖子
1 k: v' o) i. M3 @: C1 O# q3 D0 t' \( q6 x# [
同意流泪的鱼的观点,“影响不大”,可能会干扰计数
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发表于 2013-6-25 15:14 |只看该作者
红细胞太多,用显微镜不易观察,据我们的经验,对PBMC的生长影响不利
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发表于 2013-6-25 15:27 |只看该作者
红细胞过多,对单核细胞的生长肯定存在影响的,与生存空间都有竞争关系,最好是进行优化分离液和离心参数,我用FICOLL分离脐血,有些标本本身就是容易白膜层混有红细胞。
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发表于 2013-6-25 15:53 |只看该作者
回复 小公 的帖子
+ _* Z8 t. t6 y* P/ y' r% Q- A7 r- K/ q' z
是的呢,这正是我现在面临的问题,你们离心力大概多少G呢,应该适当提高离心转速吧。混入红细胞后,是否会引起细胞的粘连呢
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发表于 2013-6-25 17:11 |只看该作者
如果红细胞比较多,用裂解液裂解一下,掌控好裂解尺度。如果红细胞少,就没必要管它,它会自行裂解掉的。
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