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人杰鬼雄 发表于 2013-9-24 09:34

如何提高CIK细胞中CD3+CD56+的量?

最近在做CIK细胞培养方面的实验,按照最基本的培养体系——无血清培养基+CD3单抗+细胞因子(IFN,IL-2,IL-1),培养16天左右,CD3+CD56+细胞含量只有12%左右,低于文献报道,请问如何提高该细胞的含量,需要添加其他细胞因子吗,若要添加,浓度应控制在什么范围内?

孙帅帅 发表于 2013-9-24 11:11

你可以 尝试用 含有胎牛血清的培养基培养~  CD3激发型单抗能够模拟抗原与TCR/CD3复合物的识别和激活过程,从而引起T细胞的增殖与活化,因此是CIK细胞培养中不可或缺的刺激因素;IL-2还可刺激NK细胞的生长并增强其杀伤能力。因此CIK细胞培养中须添加IL-2,以促进T细胞的增殖与活化;在诱导CIK细胞形成的过程中加入IFN- g ,可降低IL-2的用量。研究发现,IFN-g加入的顺序与CIK的细胞毒活性密切相关。先加入IFN- g,培养24后再加入IL-2,可明显提高CIK的细胞毒活性。

luyue6453 发表于 2013-9-25 09:48

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CD3激发型单抗?你用的是什么厂家的,型号能给一下吗?

孙帅帅 发表于 2013-9-26 11:26

OKT-3(CD3)肯定是 激发型单抗啊!!!

人杰鬼雄 发表于 2013-10-1 09:11

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谢谢,用做临床的话,我们是不能用含动物成分的试剂的,而且现在加的都是自体血清。

星空雾雨 发表于 2013-10-8 23:09

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请问 你用的是什么培养基

lyj-0017 发表于 2013-11-28 21:08

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能否将你做流式的FSC/SSC图、圈门以及CD3/CD56双参数图发上来看看呢?想向您学习一下,多谢了~

get0715 发表于 2014-4-23 15:44

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想请教一下,如何提高双阳性细胞的比例,我一直培养的CIK数量不成问题,只是双阳性的细胞太少了。可否请教IFN-g因子使用的浓度么?还需要添加其他因子么?

3254938 发表于 2014-4-23 16:45

用宝日医的GTT551,效果还不错

shamoye 发表于 2014-4-25 15:57

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其实现在做临床的好多也在用含太牛的血清,回输时经过清洗没什么问题的
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