293T细胞污染问题

小咪咪

养293T的时候发现液面上漂了一层一团一团的细胞，怎么洗也洗不掉，我想请问一下有谁知道是什么污染啊？原图附上; T2 ~( {) j* ]6 p% q! r

2013-10-5 17:17 上传

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孤野知—少帅

你消化了多长时间，一般293T用胰酶消化一分钟就可以了，吹打一下应该不会有团块细胞出现的。( T5 D7 D& i9 M5 t" d5 f
不过看你的图应该是污染了

小咪咪

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% W8 v- f9 e4 m( A+ u1 f4 ?( S, T! s3 n& g  Z& A1 Y
不是消化，是培养的时候不知从哪里长出来的。由于293T贴壁不牢，我一般直接吹打，很少用胰酶消化的。这个我估计就是污染，但具体是什么污染还没有确定。

孤野知—少帅

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1 Q* n4 n  f" ]3 ?$ {7 p! m为什么一定要查出它是什么污染呢，操作不慎很有可能导致一些不确定的污染，你可以再按严格操作做一皿试试看

xuyang0317

是什么导致的污染应该很难查到的，细胞分离操作每一步都得小心，每一步的操作不慎都可能导致污染，良好的操作流程是必要的，你再分离一次，每一步要细心，每一步要小心，尽量靠近酒精灯操作，每次在外面拿了东西都有给自己的双手消毒，操作工具要过火。。。。你都得注意！

小咪咪

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' v; H9 |! f2 I7 U  C- k/ c- w+ X8 H
因为那瓶细胞是我们刚买的，一养就出现这样的问题，必须了解清楚。对于你提出的问题，我们已经通过对比实验排除了。要找出原因是因为这种污染正向其他的细胞蔓延，我怕污染都别的细胞，现在都丢弃了，但必须给别人公司一个说法。so...

小咪咪

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9 m; x% \' z) G2 K; l0 d' J
& n  @9 @, @6 X谢谢您的答复，但我可以肯定不是基本操作的问题。

元芳

1640+FBS?& W& I) }6 e4 }" N
你确定没有用错培养液吗？) Q$ N+ }# f9 Z: C" v  s$ {1 d
我记得经典培养液都是DMEM+FBS。1640通常养悬浮细胞。. i, \, z# P! ?
你的细胞不像污染，但是状态不好。漂浮物应该是死细胞团。

小咪咪

回复 元芳 的帖子1 B9 e/ _, a* _9 ?1 [9 a2 ^
+ Q; i" S( D  z) D# |6 a
那个是买回来的时候瓶子上写的，应该是他们的培养基，我后来是用DMEM的。一开始我也怀疑是死细胞团，但后来换液的时候用PBS缓冲液怎么洗都洗不掉，跟它放一起的细胞也开始出现这种情况，所以我才确定这个是污染的。

friendly0722

像霉菌