求助，关于基因全长的扩增 - 实验室综合讨论区干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 › 干细胞之家论坛 › 干细胞实验室技术交流 › 实验室综合讨论区 › 求助，关于基因全长的扩增



免疫细胞治疗专区	欢迎关注干细胞微信公众号

发新帖

查看: 25020\|回复: 3	go [其他类别] 求助，关于基因全长的扩增 [复制链接]

Rank: 4

积分: 2917
威望: 2917
包包: 6530

优秀会员金话筒

楼主

发表于 2013-10-12 21:31 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

50包包

近期准备扩一个基因的全长，但是设计引物的时候发现，用primer5设计该序列引物，没有一条引物适合，因为要超标达这个基因，所以必须扩这个基因CDS的全长，但是怎么设计这个基因全长的引物呢？之前一个基因也是扩不出来，所以就直接合成了，但是合成的话，成本很高，所以想试试看看能不能扩出来，希望大家帮忙分析一下！谢谢！还有大家能推荐一下比较好的，设计扩全长引物的网站吗？或者方法，谢谢！

已有 1 人评分	威望	包包	收起理由
细胞海洋	+ 2	+ 10	欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2 包包 + 10 查看全部评分

收藏0 分享0 顶0 踩0

回复引用

举报返回顶部

Rank: 3 Rank: 3

积分: 844
威望: 844
包包: 1

金话筒优秀会员

沙发

发表于 2013-10-16 08:48 |只看该作者

2边也扩增一下就可以了

已有 2 人评分	威望	包包	收起理由
细胞海洋	+ 2	+ 10	欢迎参与讨论
huangcong1988		+ 5	谢谢

总评分: 威望 + 2 包包 + 15 查看全部评分

回复引用

举报返回顶部

Rank: 4

积分: 2917
威望: 2917
包包: 6530

优秀会员金话筒

藤椅

发表于 2013-10-16 08:50 |只看该作者

回复 daviddow 的帖子
# F% x8 }& ?: Q
已经合了引物，准备试试把CDS稍微加长一点再扩，但愿能成功！还有其它应该注意的么？

已有 1 人评分	威望	包包	收起理由
细胞海洋	+ 1	+ 5	欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 1 包包 + 5 查看全部评分

回复引用

举报返回顶部

Rank: 2

积分: 76
威望: 76
包包: 468

板凳

发表于 2013-10-21 16:44 |只看该作者

干细胞之家微信公众号

首先从NCBI库中找找你所需要的基因别人是否已经测序公布，如果公布了就很easy了，把他的序列copy下来，从两端设计特异性的引物就可以了。如果你所需要的基因没有被公布，那就找亲缘性最高的物种的该基因然后设计兼并引物进行扩增。其实扩基因有很多种方法，不难的，一种方法行不通就换种方法。祝顺利~

已有 1 人评分	威望	包包	收起理由
细胞海洋	+ 6	+ 20	欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 6 包包 + 20 查看全部评分

回复引用

举报返回顶部

‹ 上一主题|下一主题 ›

发新帖

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2024-5-18 05:30

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.