关于脐血单个核细胞冻存结块的问题 - 造血干细胞专区干细胞之家

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金话筒帅哥研究员小小研究员优秀会员

楼主

发表于 2014-2-28 14:03 |只看该作者 |正序浏览 |打印

为什么我们冻存的脐血单个核细胞在复苏的时候总是出现结块呢？有什么解决方法吗？或者有哪位大神能够提供几篇关于脐血单个核细胞冻存的文献（时间不要太久的）或者无血清冻存液的文献！我们是用的90%的自体血清+10%的DMSO，冻存时候放到程序降温盒中！

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sdudai

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13楼

发表于 2014-10-17 09:22 |只看该作者

回复孙帅帅的帖子" s& R1 F& U# j

最直观的是死细胞

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sdudai

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12楼

发表于 2014-10-17 09:20 |只看该作者

自体血清？滤掉中性蛋白等蛋白质了，一般自体血清使用是需要处理的啊
2 t5 J; F2 {4 d1 J3 i' _

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细胞海洋

超级版主

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小小研究员

11楼

发表于 2014-10-17 09:03 |只看该作者

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crystalzyj

新手上路

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10楼

发表于 2014-10-16 16:54 |只看该作者

楼主，请问你这个问题解决了吗？请问是怎么解决的呢？跪求指导，谢谢！

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swtarron

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9楼

发表于 2014-3-5 16:16 |只看该作者

1.有没有可能是分离时脐血有凝血，因为有的凝血开始是检查不出来的，我就遇到过开始的时候没有凝血，然后离心完后发现血浆中有絮状沉淀，也是凝血的一种。
2.复苏是水浴时间的长短问题，细胞在冰晶期是非常脆弱的，如果时间太长，会造成细胞死亡，可能出现结块。! f; P% y: d; k! `3 S

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a52602589

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8楼

发表于 2014-3-5 11:02 |只看该作者

血清56度灭活，30min离心掉沉淀蛋白就可以了

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fuyinsheng

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7楼

发表于 2014-3-3 13:54 |只看该作者

首先你的细胞可能在降温过程中温度有明显波动，使细胞溶解，其内的胞浆等物质流出会出现团状现象，也有可能是离心力过大把细胞离碎了，你可以适当下调离心速度看看情况有没有好一些，另外确保降温过程中能够持续降温。

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孙帅帅

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金话筒帅哥研究员小小研究员优秀会员

地板

发表于 2014-3-2 11:24 |只看该作者

回复 luyue6453 的帖子
) v- w3 Y f( b* ^9 J
非常感谢！！！

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孙帅帅