关于脐血单个核细胞冻存结块的问题

孙帅帅

为什么我们冻存的脐血单个核细胞在复苏的时候总是出现结块呢？有什么解决方法吗？或者有哪位大神能够提供几篇关于脐血单个核细胞冻存的文献（时间不要太久的）或者无血清冻存液的文献！我们是用的90%的自体血清+10%的DMSO，冻存时候放到程序降温盒中！

luyue6453

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" g1 y" [9 Q5 k5 ~: q' o& W& r我以前看到文章，看看对你时候有帮组

孙帅帅

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孙帅帅

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孙帅帅

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孙帅帅

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fuyinsheng

首先你的细胞可能在降温过程中温度有明显波动，使细胞溶解，其内的胞浆等物质流出会出现团状现象，也有可能是离心力过大把细胞离碎了，你可以适当下调离心速度看看情况有没有好一些，另外确保降温过程中能够持续降温。

a52602589

血清56度灭活，30min离心掉沉淀蛋白就可以了

swtarron

1.有没有可能是分离时脐血有凝血，因为有的凝血开始是检查不出来的，我就遇到过开始的时候没有凝血，然后离心完后发现血浆中有絮状沉淀，也是凝血的一种。
! y( _% V3 O$ ~! _, k" |3 a  i2.复苏是水浴时间的长短问题，细胞在冰晶期是非常脆弱的，如果时间太长，会造成细胞死亡，可能出现结块。0 }' U$ k1 a. J6 W

crystalzyj

楼主，请问你这个问题解决了吗？请问是怎么解决的呢？跪求指导，谢谢！