求助原代肿瘤干细胞培养实验技术

nyming2008

大家好，本人在养原代肝癌干细胞，但是一直没有结果，很是着急，请问哪位朋友做过此类实验的，能给我点启示吗？本人将感激不尽！谢谢大家！

nyming2008

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+ v7 V$ e- j, b% r. m结果就是没有干细胞（显微镜下可见桑葚样），大多细胞是聚集在一起的。我用的培养基是DMEM/F12 ，添加的是EGF, bFGF ,B-27,胰岛素及双抗，打算用CD133及CD90流式细胞仪鉴定，请问你或你们实验室谁在样这样的细胞，还有，你们做的乳腺癌和肺癌的，养出来了没？

nyming2008

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% }4 b9 _) {( \3 t7 l我用的培养基是DMEM/F12 ，添加的是EGF, bFGF ,B-27,胰岛素及双抗，打算用CD133及CD90流式细胞仪鉴定，请问你或你们实验室谁在样这样的细胞？

nyming2008

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; R1 N! F% g! X- C9 |5 x( }4 S3 j
; R9 G5 I1 c3 @! F麻烦你能给我说一下他的联系方式吗？我请教一下他，谢谢了！

nyming2008

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- v) _8 T) S4 p& B" I/ S: v
  a6 y5 Z; U8 ]. h: `. d我是直接无血清培养

nyming2008

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# R! C7 k0 p4 H9 g) Y$ V$ t( v$ e& O( q* o8 j) `7 a# R9 q1 V
请问你是用哪种酶消化的？消化多长时间？

nyming2008

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' e4 c" }& V1 `+ b3 {各个酶的剂量是多少？你是37度4小时吗？

nyming2008

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1 c( s# g; u' e0 N) K
2 ?; X; \: h/ a. _  n5 U1 S我跟你的这个消化方法及用量都一样，我有两次消化了4个小时，结果组织全消化了，而且不能用了。

nyming2008

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' I0 m: q0 D6 a好的，谢谢了，我在试试！