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western 疑问 [复制链接]

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楼主
发表于 2014-5-7 11:11 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印
最近做western,蛋白分子量大小为,40_55kda,我电泳时间为120min,100V,转膜为100mA,100min,一抗跟二抗稀释均为1::2000(稀释比例都不算高),结果照胶完全没带,连内参也没有带,这是为什么呢?求大神指点,谢谢了先!
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沙发
发表于 2014-5-7 16:55 |显示全部帖子
回复 ciweiyuan 的帖子
) R( Q5 E- f$ q0 _) V! x
, N; @8 o, [& U. B2 N6 H湿转

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藤椅
发表于 2014-5-7 16:56 |显示全部帖子
回复 青云之上 的帖子: ]# s2 g3 \  H! Z: Z, W- E
) u# J. q( B! a% ]: |
跑完电泳怎么看提的蛋白没问题?考染之后胶还能转膜?考染后怎么看能看出蛋白样品没有降解呢?
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板凳
发表于 2014-5-7 16:57 |显示全部帖子
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回复 青云之上 的帖子8 C' ?  G; D' B- M

7 u. Y/ m9 Q1 v; \6 H8 U" x还有,我转膜以后marker都转上了,就不知道条带是不是也一样转上了
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