胎牛血清培养转无血清培养间充质干细胞

莫邪小仙

最近做有血清转无血清培养，细胞总是死掉。大家帮忙分析一下，具体操作如下：1.复苏之前冻存的有血清培养的细胞，传代培养。2.待细胞状态较好时收集细胞，用无血清培养基洗两次，再重悬接入新瓶，加入无血清培养基培养。3.但是第2天细胞就死光光了。。。9 ]5 O2 r# m7 f# G
加大接种密度也不行，另外好多人都说要进行无血清梯度培养，但是那样要经过好几次传代，能有什么办法直接从有血清培养直接转到无血清培养，并且细胞不全部死完的？

莫邪小仙

回复 wuxiao101325 的帖子
3 ]2 p. @# Q1 E
& U! n! Z8 }7 B) b7 w9 D/ J# z不是自己配的，是买的商品化的，里面有双抗和因子用的时候直接加进去就可以了。没有铺基质，用的nest的瓶子。

莫邪小仙

回复 野猪 的帖子$ t) h% H; c* O* l2 H6 {

' Z9 W  W# o9 r) t培养基是买的，厂家说没有遇到过这种情况。。。你不知道有多惨，细胞死的我都心疼，刚养出来的就被无血清祸害死了

莫邪小仙

回复 王张凡 的帖子
5 w; c; G$ J6 x1 U7 B2 N5 G1 ]
# n2 K+ Z$ I+ c$ [; H% \) C从10%转到5%又转到1%，细胞还是死了。。怎么办

莫邪小仙

回复 维维睡啦 的帖子# r7 {, }% ^3 c. v

) y4 ~! V& z. y' Z是逐步减少血清量的，细胞还是耐受不住又都死了，有什么好的办法没