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脐带间充质干细胞培养:在原代培养过程中,多少天传代一次合适呢?每两天换液合适吗?   [复制链接]

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发表于 2015-9-10 21:13 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 细胞海洋 于 2015-9-11 07:56 编辑
$ P- U. T7 Q( N1 k( G, F- u$ Z3 U: R$ A0 p1 O1 I* b9 H6 ~
     在原代培养过程中,多少天传代一次合适呢?每两天换液合适吗?
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沙发
发表于 2015-9-11 08:44 |只看该作者
回复 stmcell 的帖子  Q3 d$ u6 P" y' G$ i- i
* K4 t( y) V& t  P  P$ E7 H
多少天传代应该取决于细胞的生长状态,一般长到80%~90%就可以传代了。换液也是如此,而且多长时间换液也和你加入的培养液的量有关,可以根据培养液的颜色判断是否需要换液。我们一般3~4天换一次,根据具体情况及实验要求。
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发表于 2015-9-11 09:12 |只看该作者
同意,主要是由细胞的生长决定,如果状态好的,一般原代培养4天左右可以传代了
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发表于 2015-9-11 09:42 |只看该作者
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首先你没有说明你是用什么方法培养的原代,是组织块法还是酶消化法。如果是酶消化法那就要你自己根据细胞的生长情况而定,换液不需要那么勤,可以适当补液。如果是组织块法,那么就在4或5天时半量换液(或者就直接加入新培养基),在10天左右的时候全量换液,根据细胞生长状况,如果爬出的细胞较多就可以早一天换液,如果细胞很少,就多等一直两天。大概在14天左右的时候就可以传代了。通常组织块法很不均匀,要看有大部分局部细胞已经汇合了,就要传代了,一定要根据自己的情况而定。
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发表于 2015-9-11 09:49 |只看该作者
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发表于 2015-9-11 13:04 |只看该作者
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发表于 2015-9-15 10:08 |只看该作者
如果你用的是组织块法的话,建议你不要等到贴壁满80%后在传代,原代细胞长的慢,60%-70%传代家可以,不然之前长出来的就会老化的很厉害
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发表于 2015-9-15 15:07 |只看该作者
细胞不多时换液不要太频繁,大概4-5天换液即可,等细胞集落很多时可以适当缩短一下时间。
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发表于 2015-9-16 09:33 |只看该作者
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发表于 2015-9-29 15:23 |只看该作者
看细胞生长的状态喽,长得很快两天就可以换,但是一直没怎么变化就换液还有可能把细胞洗掉,不过一般都是三到四天吧。
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