CHO无血清培养基

CHO无血清培养基

详细信息

CHO无血清培养基   用途与描述】

培养基适合多种不同来源的CHO细胞株,如用于Lonza来源的GS-CHO细胞的培养及重组蛋白生产,也可用于Gibco来源的 CHO-S 细胞的培养及重组蛋白生产。也适用于重组蛋白研究用途。

 

   CHO无血清培养基    NC0302     1000mL/瓶       2-8°C保存      效期12个月

 

(特别说明:本产品不含 L-谷氨酰胺,对于非GS系统的细胞,使用时需加入 终浓度为4 mM 的 L-谷氨酰胺。    不含次黄嘌呤和胸苷(HT),在培养二氢叶酸还原酶缺陷型(dhfr-)细胞时需要额外添加,推荐添加浓度为13.6 mg/L的次黄嘌呤与3.87mg/L的胸苷。)

 

CHO无血清培养基   产品优势】

1.无血清,低蛋白;

2.采用批次培养,CHO最大生长密度可达9.0x106cells/mL;

3.CHO细胞自接种开始至培养最高密度仅需要3-4天;

4.培养基适合多种不同来源的CHO细胞株。

 

CHO无血清培养基   产品性能】


 一、GS-CHO细胞株在Yocon培养基及Hyclone培养基的生长对比数据

细胞株:所用CHO细胞株为LONZA公司来源的生产级别的工程细胞株;

对照培养基:为Hyclone公司的HyCell CHO培养基,产品货号为SH30934;

培养形式:采用125mL摇瓶批次培养的方式,培养条件为5%CO2,转速为120r/min。



最大生长密度:Yocon培养基中,第4天达到最大生长密度 9.08x106cells/mL;

                     Hyclone培养基中,第6天达到最大生长密度1.118x107cells/mL。

细胞倍增时间:Yocon培养基中,第4天即达到了细胞密度峰值

                    Hyclone培养基中,第6天达到 细胞密度峰值

细胞活率:培养过程中,细胞活率稳定维持在90%以上

 

二、CHO-S细胞株在Yocon培养基及Hyclone培养基的生长对比数据

细胞株:所用CHO细胞株为Gibco公司来源的CHO-S空白细胞株;

对照培养基:为Hyclone公司的HyCell CHO培养基,产品货号为SH30934;

培养形式:采用125mL摇瓶批次培养的方式,培养条件为5%CO2,转速为120r/min。



最大生长密度:Yocon培养基中,第4天达到最大生长密度 9.15x106cells/mL;

                      Hyclone培养基中,第5天达到最大生长密度1.113x107cells/mL。

细胞倍增时间:Yocon培养基中,第4天即达到了细胞密度峰值

                     Hyclone培养基中,第5天达到 细胞密度峰值

细胞活率:培养过程中,细胞活率稳定维持在90%以上

 

三、GS-CHO细胞,从其他培养基转入Yocon培养基连续传代情况 

GS-CHO细胞从Hyclone的培养基中培养,后接种至Yocon培养基中进行培养:

GS-CHO细胞,转入前HyCell CHO培养基的生长状态,可见有一定比例的“巨型细胞” 

GS-CHO细胞,转入Yocon培养基后生长状态,细胞大小相对均匀,圆润透亮,分散良好


GS-CHO细胞从Hyclone的培养基中培养,后接种至Yocon培养基连续培养4代,细胞生长持续稳定:

四、CHO-S细胞,从其他培养基转入Yocon培养基连续传代情况

CHO-S细胞从Hyclone的培养基中培养,后接种至Yocon培养基中进行培养:  

CHO-S细胞,转入前HyCell CHO培养基的生长状态,细胞大小不均匀,有碎片

CHO-S细胞,转入Yocon培养基后生长状态,细胞大小相对均匀,圆润透亮,分散良好。

 

CHO-S细胞从Hyclone的培养基中培养,后接种至Yocon培养基连续培养4代,细胞生长持续稳定:     

    

                 

客户经常提问的问题】

Q: 使用CHO无血清培养基较传统血清培养基有哪些优势?

A: 传统血清培养基中加入了动物血清,首先血清的价格高昂,其次血清的成分十分复杂,很多成分不明晰,而且由于来源问题,批间差异很大,存在病毒、支原体等微生物的污染的风险,会对后期实验带来损失;CHO无血清培养基采用血清替代成分,避免了使用血清带来的问题,成本也更低、更加安全,为后期工作提供了便利。

 

Q: 使用Yocon CHO无血清培养基培养细胞的生长情况如何?

A: Yocon无血清培养基培养的细胞形态规则、分散良好、生长速度快,培养4天左右可达到高细胞密度可以达到 9e6 cells/mL,不同细胞株高密度可能有所不同,细胞活率在90%以上。

 

Q: 以前使用培养基加血清的方式或使用其它品牌无血清培养基,可以直接转到Yocon无血清培养基中培养吗?

A: 通常情况下,在传统血清培养基中培养的CHO细胞或者在其他无血清培养基中培养的CHO细胞可以直接传代至Yocon CHO培养基中进行培养。个别情况下,直接替换为Yocon CHO培养基后细胞不能正常生长,具体表现为传代后细胞状态变差,死亡率逐渐变高,形态不再呈现规则的圆形。这种情况下,建议改用逐步替换的方法,具体操作见操作注意事项:细胞适应方法。。

 

Q: 使用CHO无血清培养基培养细胞时细胞接种密度多少合适?

A: 推荐接种细胞密度为0.3-0.5e6 cells/mL,实际测试接种密度可以低至0.15e6 cells/mL,但此密度下细胞前期生长需要一定时间,为避免时间的浪费,不建议接种密度过低。

 

Q: 为什么我试用你们公司的培养基,细胞大密度达不到9e6cells/mL?

A: 一般加血清的方式培养或使用其它品牌无血清培养基培养的CHO细胞在换用Yocon无血清培养基的过程中,可以实现直接替换(即细胞直接转入到我们培养基中可以正常生长)。但是“直接替换”并不等同于“完全适应“。更换后第一代,细胞先需要适应新的培养环境,并不能立即体现出其实际的培养性能。更换为我们培养基中后,连续传代2-3次,一方面可以去除原培养基残留影响,另一方面细胞可以完全适应至我们的培养基,即可实现高密度。

 

Q: 为什么我的CHO细胞在长至大密度后再次接种,其生长会变差?

A: 细胞在达到大生长密度的时候实际已经开始衰退。所以在大密度传代,细胞接种后并不能表现出良好的生长,往往需要2-3天的时间逐渐恢复状态。要保证种子细胞一直处于良好状态,一定要在其处于对数生长期时进行传代。

 

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