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六孔板加胰酶量  

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发表于 2016-1-17 19:16 |显示全部帖子
本帖最后由 1195963542 于 2016-1-17 19:16 编辑
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6孔板加胰酶的浓度和胰酶的量  推荐是多少呢  
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发表于 2016-1-17 20:36 |显示全部帖子
1ml够了,前提是要覆盖上整个底面。控制时间在5min内
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发表于 2016-1-18 08:59 |显示全部帖子
回复 1195963542 的帖子2 G) s( K. `4 Z
1 C$ P6 B! |: U- g
0.25胰酶(不含钙、镁离子,含EDTA),6孔板的一个孔加0.5ml-1ml即可,消化时间根据细胞类型和细胞密度不同,一般为2-5min。
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发表于 2016-1-18 09:14 |显示全部帖子
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加0.25的胰酶,每孔500微升-1mL,最好在37度反应2-5分钟,过程中可以显微镜下观察,细胞呈圆亮的状态,飘起来了就可以终止消化了。
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金话筒 优秀会员 帅哥研究员

发表于 2016-1-18 10:46 |显示全部帖子
加0.25胰酶(不含钙、镁离子,含EDTA),每个孔加0.5ml-1ml,放入细胞培养箱可以加速消化,消化时间根据细胞类型和细胞密度不同,以镜下观察细胞呈圆亮的状态脱离底面为准(即刻终止胰酶消化作用)。
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发表于 2016-1-18 11:12 |显示全部帖子
回复 nichifanlema2 的帖子
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金话筒 优秀会员 研讨会精英

发表于 2016-1-19 00:12 |显示全部帖子
EDTA胰酶的话,300ul足矣,但是很奇怪的是,如果是24孔板,则需要至少500ul,不知有没有其他人发现了这个现象呢?
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发表于 2016-1-19 14:55 |显示全部帖子
0.1--0.25的胰酶,6孔板的话每孔0.5-1mL,最好在37°左右5分钟,过程中可以显微镜下观察,细胞飘起来了就用血清类终止消化,如果是用来传代就去离心把胰酶离掉。
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发表于 2016-2-2 13:30 |显示全部帖子
回复 king8 的帖子2 X3 L* l: j' Y8 h1 ~5 a$ @
1 [% ^" s' f8 _4 Y5 K
谢谢

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发表于 2016-2-2 13:31 |显示全部帖子
回复 nichifanlema2 的帖子, p/ o4 g  ^/ [, k

9 a7 O3 D0 q. F谢谢
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