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楼主: happy_noel
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关于细胞消化后成团的问题   [复制链接]

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发表于 2016-1-20 16:59 |只看该作者
你看看是不是消化时间的问题  消化时间太长的话 就会成团
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发表于 2016-1-21 08:33 |只看该作者
回复 happy_noel 的帖子5 V" M) K2 E8 r" z. b
; {* }- l% N( g" V: |* E
不知道你消化多长时间,消化时间过长会使细胞死亡释放出DNA,相互粘连形成团状。
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发表于 2016-1-21 15:57 |只看该作者
细胞抱成团,有几种可能,
: _7 u. J6 \7 Q6 W) ^2 J, Y1.比较大的可能是细胞太满了,楼主传代时间晚了,造成细胞之间黏附了,由于消化的不均一性,造成细胞之间成团,当然楼主也可以考虑细胞传代次数是不是太多了,细胞老了,那就换巴# q: {# L. t0 f
2.消化下来离心,然后吹开,传代到新的培养瓶,注意密度不要太大,然后密切观察细胞生长情况,70-80%时一定要消化,不能让细胞长太满了
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发表于 2016-1-29 08:10 |只看该作者
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回复 cyl黄金杖 的帖子
  H% a4 N! y, \0 ~, Y9 ?8 f- ~& B- a* d1 b+ e
好的,我自己试试吧

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金话筒 优秀会员

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发表于 2016-1-30 09:31 |只看该作者
个人感觉还是和细胞类型以及细胞代数 密度有关系  消化时间一般没必要太长  成团是小事  主要对细胞损伤太大了  
; S" B) m. D% R5 }- S还有就是 一般成团 反复吹打  效果不是很好  最好采用滤网 过滤下 比较靠谱
0 I2 T2 H/ F' _5 ?) G! `纯属个人观点  
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发表于 2016-2-2 11:58 |只看该作者
密度不要太大,换含有EDTA的胰酶试试
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发表于 2016-2-2 14:49 |只看该作者
细胞成团可能是细胞密度过大,或培养时间过长,或细胞老化,或消化时间过长。" u# C8 b4 R' p6 }1 j/ N: E
我们消化MSC时间一般在常温3min即可,最长不超过10min,轻拍培养瓶,肉眼可见像沙状脱落。, u6 @+ c! |1 j! I3 V; m
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发表于 2016-2-2 16:07 |只看该作者
回复 happy_noel 的帖子0 p2 O! v. ]" W( Y2 M

" P! T  g" H. k) j+ A4 P& T三点可能的原因:消化前细胞过密;消化时间不足;胰酶存放时间过久
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