外周血细胞分离效果不好

大少爷

以我多年经验，无非这几个原因：1. 细胞分离液质量问题，批次分离液密度不稳定，分离效果差；2. 离心参数设置不当，离心效果差；3. 血液抗凝剂选择不当，一般肝素钠抗凝较好，这个可能性较小。其它的原因都不靠谱。

ET生物人

应该抽完血尽快处理，不要放低温的地方或太久！

momoenn

回复 biluolinyu 的帖子6 G( t% D9 e8 Q* Q

8 M: b1 B- X2 @) s3 y* {Ficoll绝对不能37度预热，或者说不能预热到37度。因为温度会影响密度，我们通常说的密度都是在20°下测的。这也就是看的说明书都要求温度是18-20°的原因

fenlichong

应该就是没恢复到室温，之前有过4℃放置过夜然后将血液和试剂都恢复到室温分离的白膜层也没问题。

免疫与细胞

最好最安全的办法就是再离心一次

biluolinyu

回复 momoenn 的帖子# K) m# v, m, g0 q7 w0 d5 }
0 L1 X& t2 Y% A" L
我有段时间都是直接扔到培养箱里预热的

momoenn

回复 biluolinyu 的帖子: S( x2 ?7 i0 t  W3 g6 M) n3 ~1 S
, k0 ~7 B" E2 |4 S
额。是从培养箱里拿出来直接用的吗？结果怎么样啊？

994545

白膜只是和上清模糊？  那直接吸了 低离心力多洗一两次就好了。。（看得率）  多次这样的话可以考虑加长ficoll的离心时间，你是多少时间？      

拉二胡的拉尔夫

回复 why77yhw 的帖子
( T/ {% H' y- b0 k6 c6 i/ ^6 O. p1 o* U- W% b) j
我是操作过的，ficoll的核心就是依靠密度差来分离，添加pBS就是破坏1.795的密度。最好是都吸上来，然后添加新的分离液在来一遍。

拉二胡的拉尔夫

回复 拉二胡的拉尔夫 的帖子
- x# e' S! s) s5 [; Y6 m/ s! l6 f2 _4 L9 G  E/ M$ X2 k
密度是1.079，打错了