脐带间充质干细胞的消化传代

yxwfly

一般用胰酶消化一两分钟，用手拍打瓶子，细胞就会脱落下来，然后用加了血清的培养基终止消化，并且冲洗瓶子，收集到离心管中，离心后重悬，过滤掉组织块，放入原瓶中培养。

saliai2016

原代因为细胞不是均匀生长
" m9 v' ~' n* r- s: d, \传代的时候计数还是比较重要的, ?" I6 b# E- z# |, j2 ?) [+ p
我一般接种密度是5*104个/mL
5 r5 C7 b9 R3 {' I无所谓几传几8 V0 n9 x; C: {: b9 o
脐带间充质干细胞还是比较容易消化的
" w. C, x' [$ W* z" n2-3min后，轻怕培养瓶，肉眼可见细胞脱落后就用完全培养基终止

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一般来说，组织块培养7~14天后就有细胞爬出了，爬出后看细胞克隆数量，一般每瓶有4-5个克隆就可以传代收获了，原代消化的时候要注意及时镜下观察，防止消化过度；传代的时候细胞密度不宜过低，过低影响细胞生长，一般都得105/ml

Jump

我们做的是等到它贴壁聚堆很密时传代

晗晗

7天左右就有细胞爬出，3天左右能在显微镜下观察到贴壁细胞，半量换液，继续培养，3天后换液细胞已经能稳定生长，每3天换一次，至细胞生长铺满瓶底大约10天左右，就可以传代了，但是要注意千万不要消化过度