MSC传代问题！

xuanwuxu

谢谢各位的指点，我再试试！

xuanwuxu

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4 k( a# K* d  x! F( W) w; ?
不仅是原代，每次传代都会有这样的问题！

蚂蚁上树

重悬培养基体积可以加大，另外多吹打几次，充分使细胞混匀，接种到瓶里后再晃动瓶底使细胞均匀铺开，在培养箱放置使也要平衡放置，放置局部过密

zhouweixing000

重悬液体可以加倍，然后一次1ml的加，例如1/2/3，3/2/1，或者干脆像楼上说的直接补到终体积重悬

cxs

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: P* J1 O+ ^  A# u, ]& j; j" |
楼上各位朋友都很热心，加多点液体重悬也好，直接加到30ml分装也好，如果是题主你一开始重悬没吹匀，以上方法并不适用，并且大家经验应该都知道30ml重悬均匀相对会比3ml重悬均匀的难度大，大家说加多点液体的前提是你已经吹匀了，只是在分的时候没均分（个人认为这个问题存在可能性较小，我们用巴氏管都没有楼主说的那么明显，如果你是用加样枪出现这种问题，那我建议你们该换枪了）。  所以最终还有赖题主自己去发现问题，把每一步小心做好。刚开始上手是这样的，感觉每一步都是问题，加油！

redmaple

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- T2 o* O4 B, f6 O/ n4 C: b" J能把你的protocol发过来么,用的什么培养基

田甜

消化后，细胞悬液就收到50ml离心管内，直接30ml培养基重悬后，接种至3个培养瓶中。